WNTアンタゴニストSFRP5によるWNT非依存的な骨代謝調節機構の解明

WNT拮抗剂SFRP5阐明不依赖WNT的骨代谢调节机制

• 批准号: 21K09216
• 负责人: 村上 康平
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Okayama University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09216/
• 关键词: WNTシグナル; 骨芽細胞; SFRP5; 骨形成; 骨代謝; Sfrp5; Wntシグナル

多くのWNTリガンドは骨形成を促進する。そのため、既知のWNTアンタゴニストは骨形成を抑制し、骨量を減少させる。Secreted frizzled-related protein 5（Sfrp5）は、脂肪細胞が分泌するWNTアンタゴニストである。申請者はSfrp5欠損マウスの骨を解析し、Sfrp5が破骨細胞の形成を抑制し、骨芽細胞の分化を促進することで、骨量を増加させることを発見した。本申請課題では、Sfrp5の骨代謝調節メカニズムを明らかにし、WNTアンタゴニストSfrp5の新たな一面を解き明かす。研究計画に則って、Sfrp5の作用を生体で確かめる実験を行った。Sfrp5または蛍光レポーター（ZsGreen）を過剰発現するアデノ随伴ウイルスを作製した。これを8週齢のマウスに静脈内投与したところ、骨芽細胞、骨細胞、破骨細胞での蛍光レポーターの発現が確認された。処置後4週目において、Sfrp5の過剰発現によって破骨細胞の形成は抑制された。しかしながら、骨量の増加が観察されなかった。また、Sfrp5が骨芽細胞の分化を促進する機序を解明するための実験を行った。共免疫沈降・質量分析により、Sfrp5と相互作用する候補分子を複数みつけた。これらに対するshRNAを発現する組換えアデノウイルスを作製した。組換えアデノウイルスを骨芽細胞に感染させ、骨芽細胞の分化を抑制する因子を複数みつけた。つまり、Sfrp5は骨芽細胞の分化を抑制する因子を拮抗することで、骨芽細胞の分化を抑制する可能性が考えられた。骨芽細胞の微量転写開始点解析技術（CAGE）により、Sfrp5が活性化する転写因子の候補を同定した。これらの転写因子を発現させる組換えアデノウイルスを作製し、骨芽細胞に発現させたところ、骨芽細胞の分化を促進する転写因子Xを同定した。今後、Sfrp5が転写因子Xを活性化させる機序を解明する。

Multi-WNT bone formation promoting bone formation. It is known that the bone formation is inhibited and the bone mass is less than that of the WNT. Secreted frizzled-related protein 5 (Sfrp5) and fat cells secrete WNT cells. The applicants reported that Sfrp5 was deficient in bone formation, bone cell formation was inhibited, bone bud differentiation was promoted, bone mass was increased, and bone mass was increased. In this application, Sfrp5 will provide information on behalf of the Sfrp5, and WNT will provide information on the other side of the application. Research plans to make sure that Sfrp5 plays an important role in the development of health care. Sfrp5 is responsible for light emission monitoring (ZsGreen) monitoring. You can see that your partner is in a position to make sure that you don't know what to do. Intranasal intranasal injection, bone bud cell, bone cell, osteoclast cell, bone cell, bone cell, bone After 4 weeks of treatment, Sfrp5 was used to observe the formation of bone fracture cells to form an inhibitory drug. The bone mass, bone mass, bone mass and bone mass were measured. The differentiation of bone germ cells in Sfrp5 promotes the differentiation of bone germ cells. Co-immune sedimentation assay was used to analyze the interaction between Sfrp5 and DNA, and the complex number of candidate molecules. Please tell me that the shRNA is going to make a difference. Tissue culture was used to detect the infection of bone germ cells and the inhibition of bone bud cell differentiation. Bone bud differentiation inhibition factor antagonism bone bud differentiation inhibition possibility of Sfrp5 bone bud differentiation. The starting point of microblotting of bone germ cells was analyzed by CAGE technique, and the writing factors of Sfrp5 activation were determined by the same method. The expression of factor X was determined by tissue culture, bone bud cell differentiation, bone bud differentiation, bone bud differentiation and bone bud differentiation. From now on, Sfrp5 will write factor X to activate the machine sequence to explain the data.

项目成果

Down-regulation of PD-L2 is a poor prognostic marker in dogs with high-grade mast cell tumor

PD-L2 下调是患有高级别肥大细胞肿瘤的犬的不良预后标志物

• 发表时间: 2023
• 作者: Kohei Murakami;Daichi Hanai;Ryusei Kimura;Ikki Mitsui;Jiro Miyamae;Akira Matsuda;Hiroaki Hemmi
• 通讯作者: Hiroaki Hemmi

Expression profile of immunoregulatory factors in canine tumors

犬肿瘤中免疫调节因子的表达谱

• DOI: 10.1016/j.vetimm.2022.110505
• 发表时间: 2022
• 期刊: Veterinary Immunology and Immunopathology
• 影响因子: 1.8
• 作者: Murakami Kohei;Miyatake Saki;Miyamae Jiro;Saeki Kanna;Shinya Mizutani;Akashi Natsuki;Mitsui Ikki;Kobayashi Kosuke;Saeki Kohei;Maeta Noritaka;Kanda Teppei;Okamura Yasuhiko;Hemmi Hiroaki
• 通讯作者: Hemmi Hiroaki

犬の腫瘍における免疫制御分子の発現プロファイル

犬肿瘤中免疫调节分子的表达谱

• 发表时间: 2023
• 作者: 宮武咲妃;宮前二朗;邊見弘明;村上康平
• 通讯作者: 村上康平

イヌ肺腺癌より樹立した上皮系および間葉系様細胞株の性状解析

犬肺腺癌上皮样和间质样细胞系的特征分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Takeuchi A;Yamamoto N;Ohmori T;Hayashi K;Miwa S;Igarashi K;Higuchi T;Abe K;Yonezawa H;Morinaga S;Araki Y;Asano Y;Saito S;Tsuchiya H.;Teramoto A;小林宏祐，村上康平，佐伯亘平，杉山晶彦
• 通讯作者: 小林宏祐，村上康平，佐伯亘平，杉山晶彦

Inhibitor of protein kinase N3 suppresses excessive bone resorption in ovariectomized mice

• DOI: 10.1007/s00774-021-01296-1
• 发表时间: 2022-01
• 期刊: Journal of Bone and Mineral Metabolism
• 影响因子: 3.3
• 作者: Shunsuke Uehara;H. Mukai;T. Yamashita;M. Koide;Kohei Murakami;N. Udagawa;Yasuhiro Kobayashi