血液神経関門の保護に着目した、神経伸長に伴う疼痛に対する新規薬物療法の開発

开发一种治疗与神经伸长相关的疼痛的新药物疗法，重点是保护血神经屏障

• 批准号: 21K09262
• 负责人: 横田 淳司
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Osaka Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09262/
• 关键词: 末梢神経; 神経伸長損傷; 疼痛; 血液神経関門; ラット; 神経神経損傷; 神経伸長; 神経内浮腫

2022年度は、ラット坐骨神経緩徐延長モデルを用いて、延長終了1日後、30日後及び50日後の3タイムポイントにおいて以下の解析を行った。1. 電気生理学的評価：延長神経が支配する腓腹筋の複合筋活動電位(CMAP)。2. 行動評価：延長神経支配領域の痛覚閾値の変化。3. 組織学的評価：延長神経の血管透過性亢進（静注色素の神経内漏出）の有無。4. 免疫組織学的評価：延長神経凍結切片におけるVEGF、VE-Cadherinの発現。5. 分子生物学的評価：延長神経のRT-PCR(VEGF、VEGF受容体、血液神経関門構成膜蛋白)。その結果、坐骨神経は伸長損傷後50日で機能的にはほぼ回復するが、伸長終了後30日に疼痛閾値は最も低下していた。伸長終了後より血管透過性が亢進し、神経内浮腫を生じ、疼痛閾値が最も低下する伸長終了後30日に免疫染色にてVEFGの発現が増強し、VE-Cadherinの発現が低下していることが明らかとなった。これより、神経伸長損傷後遅発性に出現し遷延する疼痛の病態は、VEGFの発現による血液神経関門の破綻が関連していることが推察され上記解析1-4に関しては今後N数を増やすことでさらに信頼性の高いデータ収集が期待できる。一方、リアルタイムRT-PCRによる遺伝子発現評価の解析は、神経標本より採取できるRNAが少なく、信頼できるデータを得るまでには至っていない。このため、次年度にはより微量の遺伝子発現が評価可能なマイクロPCRに解析法を変更することとし、現在予備実験中である。

In the year 2022, after the first day, the 30th day and the 50th day after the first day, 30th day and 50th day, the following analysis will be made. 1. The theory of electrical physiology: prolonging the activity potential (CMAP) of the peroneal tendons. two。 Action training: to prolong the domination of the divine domination of the field and the transformation of pain and suffering. 3. Histology: prolonged hypervascular permeability (intravenously leaking pigment). 4. Immunohistology: VEGF and VE-Cadherin were detected in lengthened neuron sections. 5. Molecular biology: elongated genitalia RT-PCR (VEGF, VEGF receptors, membrane proteins formed by blood goddesses). The results showed that the pain was the lowest in the 50 days after elongation, and the lowest in 30 days after elongation. After stretching, the vascular permeability was increased, the buoyancy was increased, and the pain was the lowest. 30 days later, immunostaining showed that VEFG was stronger and VE-Cadherin was lower. After a long period of time, the symptoms of prolonged pain have been found in the patients, and the symptoms of prolonged pain have been detected in VEGF. In the analysis of 1-4 years ago, the number of symptoms in the future is expected to increase. On the one hand, you need to know that you have a problem with RT-PCR, and that you need to know that the RNA is not available. In the following year, you may have a better understanding of the PCR analysis method, and you are now in the market.