自家脂肪由来幹細胞シートを用いた革新的な巨大骨欠損再建法の開発

开发利用自体脂肪干细胞片重建大骨缺损的创新方法

基本信息

批准号：
21K09295
负责人：
下川寛右
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09295/
关键词：
Masquelet法自家脂肪由来幹細胞自家腸骨移植骨再建

项目摘要

本研究は骨欠損治療の1つであるMasquelet法に自家脂肪由来幹細胞（ADSCs）を用いることで、健常部への侵襲の軽減と骨癒合の促進を図る新たな治療法の開発を目指すものである。ラットを対象にMasquelet法を行った。まず右大腿骨に5㎜の骨欠損を作成し、創外固定を装着後、欠損部に骨セメントをスペーサーとして留置した。2週後に2回目の手術を行い、形成されたinduced membraneの中に骨移植を行った。このとき使用する移植片を①対照群（何も充填しない）、②人工骨、③海綿骨（両側腸骨より採取）、④ADSCsを付加した人工骨の4群に分類した。前年度は、対照群、人工骨群に対して海綿骨群においてCTでの骨癒合率、組織学的な骨形成、Real-time PCRでの骨形成関連因子の発現が高いという結果をみとめ、ラットを用いた臨床に則した自家腸骨移植によるMasqueletモデルの作成に成功したと考える。このモデルの報告は前例のないものであり、学会発表も行った。最終的な目標であるADSCsを用いたモデル作成については前年度より継続しているが、仮説していたような十分な骨癒合が得られておらず、膜形成の待機期間やADSCsの形状、培養の種類など、条件を変えながら試行錯誤してきた。結果、骨分化誘導培地を経て4週間培養することで骨癒合に有利となる結果が得られる可能性が示唆された。現状は上記の骨分化誘導培地ADSCsモデルでの骨癒合率を検証中であり、今後は組織評価（免疫染色含む）、Real-time PCR評価などで他の群との比較も進めていく予定である。

这项研究旨在开发一种新的治疗方法，以减少对健康区域的侵袭，并通过使用自体脂肪衍生的干细胞（ADSC）促进骨融合，这是一种用于骨缺损的治疗方法。 Masquelet方法是在大鼠上进行的。首先，在右股骨中产生了5mm的骨缺陷，并且在外部固定后，将骨水泥作为间隔置于缺陷中。两周后，进行了第二次手术，并将骨移植到形成的诱导膜中进行。在这种情况下使用的移植物分为四组：1）对照组（无填充），2）人造骨头，3）取消骨（从伊利亚西亚骨的两侧取走），以及4）添加了ADSC的人造骨头。在上一年，我们观察到，与对照组和人造骨组相比，对照组的实时PCR和人工骨组的骨融合率，组织学骨形成以及骨形成相关因素的表达，并认为我们能够成功地使用临床上一致的自动型iLiac Bone骨骨transpractation来成功创建Masquelet模型。关于该模型的报告是前所未有的，还进行了会议演讲。尽管自上一年以来，使用ADSC进行建模的最终目标一直持续，但尚未实现足够的骨融合，并且在改变条件的同时，我们一直在反复试验和错误，例如膜形成的等待期，ADSC的形状和培养的类型。结果，建议通过骨分化诱导培养基培养四个星期，这表明结果对骨融合有利。目前，我们目前正在使用上述骨分化介质ADSC模型来验证骨融合率，我们计划继续将其与组织评估中的其他组（包括免疫染色），实时PCR评估等进行比较。