骨関連疾患（骨粗鬆症、変形性関節症、骨折）における疼痛関連神経の可視化の確立

令和4年度には、実験2の薬物治療の疼痛関連神経支配に対する効果：各疾患動物モデルに有効とされる薬物の投与前後の骨病変部の神経支配の変化を解析定量化し、各薬剤が神経支配に及ぼす影響と治療効果を検討する。（令和４年度）を予定していた。得られた結果は以下の通りである。【骨関連疾患動物モデル】7週齢雄性Sprague Dawleyラットの右膝にMIA 2mg (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) +25 μl 生食関節内に投与し、MIA注射4週間後で使用したラット変形性膝関節症モデルを用い、以下の評価項目を検討した。【疼痛行動評価】：各疾患共モデル作成前後で以下の疼痛行動試験を実施する。・von Frey （vF）, Acetone assay, hot plate test【画像評価】: In vivo imageと&CTを用い、各疾患モデルの妥当性及び病理学的評価を行う。【免疫組織化学染色(IHC)】疼痛関連感覚神経線維の描出【結果】ラット変形性膝関節症モデルにおいては、shamマウスに比し、またMIA投与で明らかな関節症性変化を生じており、有意な患側後肢足底の機械的刺激の閾値低下、患側後肢の熱刺激の閾値低下を認めた。ラット変形性膝関節症モデルは疼痛過敏性を有していることが明らかとなった。さらにMIA投与後4週でジクロフェナク（NSAIDS）入りヒアルロン酸ナトリウム（Diclofenac Etalhyaluronate Sodium (DF-HA)）0.5mgを右膝に注入、注入後4週で還流固定し、疼痛行動評価、画像評価並びに免疫組織化学染色においては後根神経節及び脊髄後角を評価した。MIA投与後DF-HA投与群ラットは有意な疼痛改善、後根神経節における炎症性疼痛マーカーの有意な低下、脊髄後角における中心性感作の改善を認めた。

令和4年度には、実験2の薬物治療の疼痛関連神経支配に対する効果：各疾患動物モデルに有効とされる薬物の投与前後の骨病変部の神経支配の変化を解析定量化し、各薬剤が神経支配に及ぼす影響と治療効果を検討する。（令和４年度）を予定していた。得られた結果は以下の通りである。【骨関連疾患動物モデル】7週齢雄性Sprague Dawleyラットの右膝にMIA 2mg (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) +25 μl 生食関節内に投与し、MIA注射4週間後で使用したラット変形性膝関節症モデルを用い、以下の評価項目を検討した。【疼痛行動評価】：各疾患共モデル作成前後で以下の疼痛行動試験を実施する。・von Frey （vF）, Acetone assay, hot plate test【画像評価】: In vivo imageと&CTを用い、各疾患モデルの妥当性及び病理学的評価を行う。【免疫組織化学染色(IHC)】疼痛関連感覚神経線維の描出【結果】ラット変形性膝関節症モデルにおいては、shamマウスに比し、またMIA投与で明らかな関節症性変化を生じており、有意な患側後肢足底の機械的刺激の閾値低下、患側後肢の熱刺激の閾値低下を認めた。ラット変形性膝関節症モデルは疼痛過敏性を有していることが明らかとなった。さらにMIA投与後4週でジクロフェナク（NSAIDS）入りヒアルロン酸ナトリウム（Diclofenac Etalhyaluronate Sodium (DF-HA)）0.5mgを右膝に注入、注入後4週で還流固定し、疼痛行動評価、画像評価並びに免疫組織化学染色においては後根神経節及び脊髄後角を評価した。MIA投与後DF-HA投与群ラットは有意な疼痛改善、後根神経節における炎症性疼痛マーカーの有意な低下、脊髄後角における中心性感作の改善を認めた。