Pathophysiological investigation of the hypoactive bladder using multiple models caused by defunctionalization, neurogenic, and obstruction

＜尿路変向による廃用性低活動膀胱回復「DRB rat」モデルの確立＞以下の手技が確立し、安定して尿路変向（両側尿管膣吻合）による萎縮膀胱ラットを作成できるようになった。①麻酔：ラットを塩酸メデトミジン0.3mg＋ミダゾラム4.0mg＋酒石酸ブトルファール5.0mg＋生理食塩水/5mlで安定した全身麻酔が施行可能。②尿道より22Gサーフロ針の外套を、安定して膀胱内に挿入し、0.1mL毎分で生理食塩水を膀胱内に注入し、膀胱内圧を測定し、ウロダイナミクス検査を安定して行うことができている。これまでコントロール群7匹および膀胱萎縮群7匹に対し、のべ14×3＝42回のウロダイナミクス検査をラットに行い、安定して低コンプライアンス膀胱を検出する手技を確立した。③膀胱に入る両側尿管および栄養血管を同定し切断、断端を7-0 Proleneをかけ膣壁に結紮固定する。以後ラットは膣排尿とする。廃用性萎縮膀胱となる6W後、および12W後にウロダイナミクス検査で低コンプライアンス膀胱を確認し、15週後に再度全身麻酔で恥骨上切開を行い、癒着を剥離して、膀胱を切除し、ラットをCO2で安楽死した。④膀胱は写真、重量、大きさ計測の上、全層をホルマリン処理、粘膜および筋層を液体窒素、またRNA later内に計14匹について保存した。⑤今後はこれらの膀胱検体につき、RNAシーケンス、RTPCR、免疫染色およびウエスタンブロットで、廃用性萎縮膀胱のメカニズムについて探る予定である。

＜尿路変向による廃用性低活動膀胱回復「DRB rat」モデルの確立＞以下の手技が確立し、安定して尿路変向（両側尿管膣吻合）による萎縮膀胱ラットを作成できるようになった。①麻酔：ラットを塩酸メデトミジン0.3mg＋ミダゾラム4.0mg＋酒石酸ブトルファール5.0mg＋生理食塩水/5mlで安定した全身麻酔が施行可能。②尿道より22Gサーフロ針の外套を、安定して膀胱内に挿入し、0.1mL毎分で生理食塩水を膀胱内に注入し、膀胱内圧を測定し、ウロダイナミクス検査を安定して行うことができている。これまでコントロール群7匹および膀胱萎縮群7匹に対し、のべ14×3＝42回のウロダイナミクス検査をラットに行い、安定して低コンプライアンス膀胱を検出する手技を確立した。③膀胱に入る両側尿管および栄養血管を同定し切断、断端を7-0 Proleneをかけ膣壁に結紮固定する。以後ラットは膣排尿とする。廃用性萎縮膀胱となる6W後、および12W後にウロダイナミクス検査で低コンプライアンス膀胱を確認し、15週後に再度全身麻酔で恥骨上切開を行い、癒着を剥離して、膀胱を切除し、ラットをCO2で安楽死した。④膀胱は写真、重量、大きさ計測の上、全層をホルマリン処理、粘膜および筋層を液体窒素、またRNA later内に計14匹について保存した。⑤今後はこれらの膀胱検体につき、RNAシーケンス、RTPCR、免疫染色およびウエスタンブロットで、廃用性萎縮膀胱のメカニズムについて探る予定である。