疾患iPS細胞由来腎オルガノイドの樹立による新規腎結石モデルと結石溶解療法の開発

通过建立患病的 iPS 细胞衍生的肾脏类器官来开发新的肾结石模型和结石溶解疗法

• 批准号: 21K09405
• 负责人: 岡田 朋記
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09405/
• 关键词: 尿路結石; iPS細胞; 腎オルガノイド; マクロファージ; 結石モデル

1.健常者および尿路結石患者由来の腎オルガノイドの作製：昨年度と同様に作製したiPS細胞を、高里（Nature, 2015）らの手法を用いて、CHIR99021、FGF9の付加により腎前駆細胞へと分化させ、遠心分離による再集合の形成と三次元培養を経て腎オルガノイドを誘導した。またFreedman（Nat Commun, 2015）らの手法を用いて、CHIR99021、B27の付加により遠心分離を行なわず、Spheroidを形成させることによる腎オルガノイドの誘導も行った。作製された腎オルガノイドの評価は、いずれの手法によるものもホールマウント免疫染色にて行った。健常者由来と尿路結石患者由来の腎オルガノイドは、WTI、LTL、E-cadherinの免疫染色によって、それぞれ糸球体、近位尿細管、遠位尿細管の構造が発現していることを確認した。2.健常者および尿路結石患者由来の腎オルガノイドでの結晶形成の相違：健常者および尿路結石患者での結晶形成の相違を確認するため、それぞれの腎オルガノイドを作製する過程でCOM結晶を共培養し、腎オルガノイド内部への結晶の取り込みを試みた。作製されたそれぞれの腎オルガノイドは透過型電子顕微鏡で観察したが、尿細管内への結晶の取り込みや、結晶形成における創意を確認することはできなかった。3.尿路結石形成における遺伝因子の相違：尿路結石形成において遺伝因子の関与を検討する場合、腎オルガノイドを形成した糸球体、近位尿細管、遠位尿細管それぞれでの検討が必要になる。それぞれの細胞へと分離するためにセルソーターを使用できる環境を整備した。

1. The patients with normal urinary tract disease were divided into two groups: last year, the same drug was used to treat iPS cells, and Gao Li (Nature, 2015) was used to use cell differentiation, heart separation and re-assembly to form a three-dimensional training strategy. The method of Freedman (Nat Commun, 2015) is to use the telephone, CHIR99021, B27 and B27 to separate the heart from each other, and the Spheroid to form a guide line. Make sure that you don't know what to do with immunostaining. The patients with normal urinary tract diseases were diagnosed by immunostaining, WTI, LTL, E-cadherin immunostaining, microspheres, proximal urinary catheters, urinary catheters and urinary catheters. two。 In normal patients, the results of urinary tract tests were correlated with each other. In patients with normal urinary tract stones, the crystals of urinary tract diseases were confirmed to be in phase. In normal patients, the results of COM tests were co-cultured, and the results of internal tests were collected from the test results. Make sure that the micrographs of the urine tube and the urine tube are detected by the transmission electron microscope, and that the results are formed by the determination of the results. 3. The formation of urinary tract stones is related to each other: the formation of urinary tract stones is related to each other: the formation of urinary tract stones is closely related to the formation of urinary tract factors: urinary tract formation, urinary tract formation and urinary tract formation. Do not use the environmental equipment to separate the environmental equipment from each other.

项目成果

iPS細胞を用いた尿路結石形成に関わる新規解析モデルの作製

使用 iPS 细胞创建与尿路结石形成相关的新分析模型

• 发表时间: 2022
• 作者: Motoki Tamai;Shuichi Tatarano;Shunsuke Okamura;Wataru Fukumoto;Issei Kawakami;Yoichi Osako;Takashi Sakaguchi;Satoshi Sugita;Masaya Yonemori;Yasutoshi Yamada;Masayuki Nakagawa;Hideki Enokida;Hirofumi Yoshino.;岡田朋記
• 通讯作者: 岡田朋記

尿路結石患者由来の iPS 細胞を用いた新規結石モデル腎オルガノイドの開発

使用源自尿路结石患者的 iPS 细胞开发新型结石模型肾脏类器官

• 发表时间: 2021
• 作者: 岡田 朋記;岡田 淳志;服部 竜也;杉野 輝明;海野 怜;田口 和己;濵本 周造;安藤 亮介;嶋田 逸誠;松永 民秀;戸澤 啓一;安井 孝周
• 通讯作者: 安井 孝周

患者由来iPS細胞を用いた尿路結石形成に関わる新規解析モデルの作製

使用患者来源的 iPS 细胞创建与尿路结石形成相关的新分析模型

• 发表时间: 2022
• 作者: Owari Takuya;Tanaka Nobumichi;Nakai Yasushi;Miyake Makito;Anai Satoshi;Kishi Shingo;Mori Shiori;Fujiwara-Tani Rina;Hojo Yudai;Mori Takuya;Kuwada Masaomi;Fujii Tomomi;Hasegawa Masatoshi;Fujimoto Kiyohide;Kuniyasu Hiroki;岡田朋記
• 通讯作者: 岡田朋記

疾患iPS細胞を用いた尿路結石モデル腎オルガノイドの樹立

利用病变 iPS 细胞建立泌尿系结石模型肾类器官

• 发表时间: 2021
• 作者: 岡田 朋記;岡田 淳志;服部 竜也;杉野 輝明;田口 和己;濵本 周造;嶋田 逸誠;松永 民秀;安井 孝周
• 通讯作者: 安井 孝周