The development of a new thawing method of ovarian tissue vitrification

CAYA世代がんサバイバーの妊孕性温存療法として卵巣組織凍結の実施例が増加している。卵巣組織凍結法として緩慢凍結法の他、卵巣組織凍結時における様々な凍結方法のプロトコールが提唱されているが、一長一短であり最適な凍結方法は未だ確立していない。本研究では卵巣組織ガラス化凍結法における新規的凍結方法を確立することを目指している。2022年度の研究成果としては、以下となる。1)加圧による組織内水分脱水への影響の確認と至適加圧値の決定2022年としては加圧システムを作成し、確立した。凍結保護剤を使用する前に、培養実験として加圧した群と加圧していない群での組織障害レベルの比較を行った結果、1atm及び1.5atmでは有意差をデーター内に見出すことができていない。今後加圧状況を上げる必要があるが加圧バルブの耐久性を整え、その後実験を再開とする。　2)Solid surface vitrification法を応用した凍結速度の効率化の立証。昨年デバイス表面の凍結、融解速度について測定系を確立したが、2022年には測定を開始したところ、耐久性が伴わずデバイスにハンダ固定にて接着した熱電対が数回の液体窒素内の急激な変化による温度測定で剥離した。現在自身でのハンダ固定ではなく、企業に委託し熱電対がレーザーにて蒸着できるか検討中である。また理論的には温度が速ければ速いほど組織障害変化は起こらないと考え、現在のデバイスに加え、より高速の熱伝導が可能と考えられるデバイスが完成した。2023年はデバイスの温度測定用熱電対の準備が整うまでの間、組織障害の有無などを優先的にデータ解析を集積している。　3)高周波を用いた卵巣融解方法の開発。　上記記載したレーザー蒸着の測定デバイスが出来次第、融解速度の計測を開始とする。また高周波を当てることで発熱しない方法を現在合わせて実施検討中である。

CAYA世代がんサバイバーの妊孕性温存療法として卵巣組織凍結の実施例が増加している。卵巣組織凍結法として緩慢凍結法の他、卵巣組織凍結時における様々な凍結方法のプロトコールが提唱されているが、一長一短であり最適な凍結方法は未だ確立していない。本研究では卵巣組織ガラス化凍結法における新規的凍結方法を確立することを目指している。2022年度の研究成果としては、以下となる。1)加圧による組織内水分脱水への影響の確認と至適加圧値の決定2022年としては加圧システムを作成し、確立した。凍結保護剤を使用する前に、培養実験として加圧した群と加圧していない群での組織障害レベルの比較を行った結果、1atm及び1.5atmでは有意差をデーター内に見出すことができていない。今後加圧状況を上げる必要があるが加圧バルブの耐久性を整え、その後実験を再開とする。　2)Solid surface vitrification法を応用した凍結速度の効率化の立証。昨年デバイス表面の凍結、融解速度について測定系を確立したが、2022年には測定を開始したところ、耐久性が伴わずデバイスにハンダ固定にて接着した熱電対が数回の液体窒素内の急激な変化による温度測定で剥離した。現在自身でのハンダ固定ではなく、企業に委託し熱電対がレーザーにて蒸着できるか検討中である。また理論的には温度が速ければ速いほど組織障害変化は起こらないと考え、現在のデバイスに加え、より高速の熱伝導が可能と考えられるデバイスが完成した。2023年はデバイスの温度測定用熱電対の準備が整うまでの間、組織障害の有無などを優先的にデータ解析を集積している。　3)高周波を用いた卵巣融解方法の開発。　上記記載したレーザー蒸着の測定デバイスが出来次第、融解速度の計測を開始とする。また高周波を当てることで発熱しない方法を現在合わせて実施検討中である。