ハイドロゲルを用いたがん幹細胞形質の誘導と新規治療標的の探索

今年度は、引き続き卵巣癌細胞株を用いたハイドロゲルによるがん幹細胞形質の誘導について検討を継続した。多種類のハイドロゲル（DN、PAMPS、PDMAAm、PCDME、PNaSS）を用いて3種類の卵巣癌細胞株（KF28、OVCAR3、OVSAHO）からがん幹細胞様の細胞を誘導できるかについて、対照群（polystylene培養皿上での培養細胞）と比較検討した。その結果、DN、PAMPS、PDMAAm、PCDMEの各ハイドロゲルを用いて培養した場合には、各卵巣癌細胞株を用いたがん幹細胞様形質の誘導について必ずしも再現性のある結果を得ることはできなかったが、PNaSSハイドロゲルを用いて培養することで、全ての卵巣癌細胞株からがん幹細胞様形質を安定的に再現性をもって誘導できることを確認した。具体的には、対照細胞群において観察される通常の2次元での平坦な増殖形態に比べ、PNaSS培養群のがん細胞は球状に変化し、集まって簇状に増殖する形態、すなわちスフェロイドを形成し、細胞増殖速度が対照群に比べて遅延することが確認された。さらに、がん幹細胞のマーカー分子であるSox2、Nanog、Oct3/4のmRNA発現がPNaSS培養群で明らかに上昇することがreal time PCR法によって確認された。さらに、抗がん剤感受性の変化について、抗がん剤耐性に関与することが知られている遺伝子であるMDR1ならびにがん細胞の浸潤能、転移能の変化について、上皮間葉転換を通じて浸潤・転移に関与する遺伝子であるtwistの発現について検討したところ、PNaSS培養群では対照群に比べて、顕著に上昇することを確認した。

今年度は、引き続き卵巣癌細胞株を用いたハイドロゲルによるがん幹細胞形質の誘導について検討を継続した。多種類のハイドロゲル（DN、PAMPS、PDMAAm、PCDME、PNaSS）を用いて3種類の卵巣癌細胞株（KF28、OVCAR3、OVSAHO）からがん幹細胞様の細胞を誘導できるかについて、対照群（polystylene培養皿上での培養細胞）と比較検討した。その結果、DN、PAMPS、PDMAAm、PCDMEの各ハイドロゲルを用いて培養した場合には、各卵巣癌細胞株を用いたがん幹細胞様形質の誘導について必ずしも再現性のある結果を得ることはできなかったが、PNaSSハイドロゲルを用いて培養することで、全ての卵巣癌細胞株からがん幹細胞様形質を安定的に再現性をもって誘導できることを確認した。具体的には、対照細胞群において観察される通常の2次元での平坦な増殖形態に比べ、PNaSS培養群のがん細胞は球状に変化し、集まって簇状に増殖する形態、すなわちスフェロイドを形成し、細胞増殖速度が対照群に比べて遅延することが確認された。さらに、がん幹細胞のマーカー分子であるSox2、Nanog、Oct3/4のmRNA発現がPNaSS培養群で明らかに上昇することがreal time PCR法によって確認された。さらに、抗がん剤感受性の変化について、抗がん剤耐性に関与することが知られている遺伝子であるMDR1ならびにがん細胞の浸潤能、転移能の変化について、上皮間葉転換を通じて浸潤・転移に関与する遺伝子であるtwistの発現について検討したところ、PNaSS培養群では対照群に比べて、顕著に上昇することを確認した。