マウスモデル確立によるpachychoroidの病態解明と新規治療法開発

通过建立小鼠模型阐明厚脉络膜的病理学并开发新的治疗方法

• 批准号: 21K09672
• 负责人: 松本 英孝
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09672/
• 关键词: Pachychoroid; マウスモデル; サルモデル; 渦静脈うっ滞; 脈絡膜血流うっ滞

Pachychoroidは、脈絡膜外層血管の拡張を伴う脈絡膜肥厚で、近年の光干渉断層計の機能向上によって存在が明らかとなり注目を集めている。加齢黄斑変性の表現型はアジア人と欧米人で異なるが、アジア人に多くみられるpachychoroidが、アジア人の加齢黄斑変性の発症に関与すると考えられている。しかし、様々な臨床研究をもってしても未だpachychoroidの病態解明には至っていない。現在考えられているpachychoroidの原因の一つが渦静脈のうっ滞であることから、本研究では、マウスを用いて渦静脈を眼外で結紮することによって渦静脈をうっ滞させ、pachychoroidが形成されるかを検証することにした。これまでの実験で、ヒト眼球と同様にマウス眼球でも各象限の強膜面に渦静脈を確認することができた。そして、結膜切開後、渦静脈を強膜面に露出させ、2～4か所の渦静脈を10-0ナイロン糸で結紮することによってマウスpachychoroidモデルを作製した。モデル作製後１週以内では、インドシアニングリーン蛍光造影で脈絡膜血管の拡張を確認することができた。また、光干渉断層計と凍結組織切片において脈絡膜の肥厚も確認することができた。近年のpachychoroidの臨床研究によって、脈絡膜分水嶺を跨ぐ渦静脈吻合がpachychotoidにおける重要な所見であることが明らかとなった。しかし、マウス眼には脈絡膜分水嶺が存在しないため渦静脈吻合の評価が行えない。そこで、我々は他の研究で使用しなかったニホンザルを用いてマウスと同様のpachychoroidモデルを作製した。耳側の2つの渦静脈を10-0ナイロン糸で結紮したところ、光干渉断層計やインドシアニングリーン蛍光造影で渦静脈拡張や分水嶺を跨ぐ渦静脈吻合を確認することができた。さらに、インドシアニングリーン蛍光造影の早期動画で脈絡毛細血管板の充盈遅延や渦静脈の拍動性血流などのpachychoroid関連疾患に特徴的な所見も確認することができた。

pachychoroid是脉络膜增厚，伴随着齿外血管的扩张，并且由于近年来光学相干断层扫描的功能的提高，它的存在被揭示出来，引起了人们的注意。与年龄相关的黄斑变性的表型在亚洲人和西方人之间有所不同，但是在亚洲人中很常见的pachychoroid被认为参与了与年龄相关的亚洲人变性的发展。但是，即使经过各种临床研究，尚未阐明pachychoroid的病理。由于目前认为涡流静脉暂停是pachychoroid的原因，因此在这项研究中，我们决定研究涡流静脉是否在使用小鼠结扎涡流静脉以及是否形成pachychoroid的小鼠外面绑扎。以前的实验使我们能够在小鼠眼睛的每个象限的巩膜表面上看到涡流静脉，就像在人眼中一样。结膜切口后，通过将涡流静脉暴露于巩膜表面并用10-0尼龙螺纹连接两到四个涡流静脉来制备小鼠pachychoroid模型。在模型制备后的一周内，吲哚苷绿色荧光成像证实了脉络膜血管的扩张。此外，在光学相干断层扫描和冷冻组织切片中也证实了脉络膜增厚。 pachychoroid的最新临床研究表明，整个脉络膜流域的涡流静脉吻合是pachyotoid的重要发现。但是，由于小鼠眼中没有脉络膜流域，因此无法评估涡流静脉吻合。因此，我们使用其他研究中未使用的日本猕猴创建了类似于小鼠的pachychoroid模型。当通过10-0尼龙螺纹连接耳朵上的两个涡流静脉时，我们能够使用光学相干性层析成像和吲哚氰氨基绿色荧光成像来确认跨流域的涡流静脉扩张和涡流静脉吻合。此外，氨基氨基绿色荧光对比的早期视频证实了与pachychoroid相关疾病的特征，例如脉络膜毛皮板的延迟填充和涡旋静脉的脉冲血流。

项目成果

サルを用いたpachychoroidモデル作製の試み

尝试使用猴子创建厚脉络膜模型

• 发表时间: 2022
• 作者: 松本英孝;向井亮;斎藤千真;星野順紀;岸章治;秋山英雄
• 通讯作者: 秋山英雄