Semaphorin 3a による角膜上皮創傷治癒および炎症メカニズムの解明

阐明 Semaphorin 3a 诱导的角膜上皮伤口愈合和炎症机制

• 批准号: 21K09753
• 负责人: 羽藤 晋
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09753/
• 关键词: 角膜上皮; 涙腺神経切断; GVHD; 炎症; ドライアイ; 涙液; 樹状細胞; 神経保護; 角膜; 創傷治癒; Semaphorin; 上皮

Semaphorin3a（以下Sema3a）は、神経末端の成長や炎症を制御する分子の一つである。これまでに我々は、角膜内の病態を測定する評価系の確立、および実験目的に則したモデルマウスの作成方法の確立を行ってきた。すなわち、角膜の生理学的な病態を確認するために、角膜各層局所における観察に優れた生体レーザー共焦点顕微鏡(以下IVCM)による経時的観察や、免疫染色による角膜内の炎症細胞浸潤の同定等を行ってきた。また当該年度は、神経保護と炎症の観点から創傷治癒機序を解明するために、涙腺神経切断ドライアイモデルマウスや、炎症モデルとして移植片対宿主病モデルマウス(以下GVHDモデルマウス)を作製し、Sema3a阻害剤点眼群と対照群のそれぞれのマウスにおける炎症所見の比較検討と、角膜の創傷治癒におけるSema3aの役割の検証を行っている。昨年度開発したIVCMのwholemount画像によって、涙腺神経切断モデルマウスの角膜上皮びらんがSema3a阻害剤によって抑制されることを確認した。また、摘出した角膜のwholemount免疫染色像から、Sema3a阻害剤によって角膜内β-tubulin陽性神経線維の増加、MHC class II陽性細胞浸潤の抑制を確認した。一方、GVHDモデルマウスに関しては、Sema3a阻害剤点眼により全身症状が悪化する個体がみられたため、その原因について解析を行っている。wholemount角膜免疫染色における樹状細胞の動態や、頸部リンパ節フローサイトメトリーにおける炎症細胞は、対照群と比較して、明らかな有意差を認めなかった。しかし、症状の個体差が大きく、現在、再試験を行っている。また、投与方法の選択肢を広げ、内服や静脈注射で経過を観察しているところである。

Semaphorin3a (the following Sema3a), the growth of the end of the god, the growth of inflammation, the control of inflammatory molecules in the first place. The method of making sure that the condition of the cornea is established. The pathological changes of the cornea, the pathological examination of the corneal physiology, the examination of the common focus microscopes (the following IVCM), the immunostaining of the inflammatory cells in the cornea, and so on. When this year's disease, the protection of inflammation, the treatment of diseases, the sequence of diagnosis and treatment, the amputation of the glands, the transection of the glands, the transplantation of host diseases, the host disease, the Sema3a, the eyes, the eyes. The cornea should be treated with Sema3a cuttings. The IVCM wholemount portrait was opened yesterday, and the epithelium of the cornea was cut off. The corneal epithelium was cut, and the corneal epithelium was blocked by Sema3a. Wholemount immunostaining was performed on the cornea, wholemount immunostaining was performed on the cornea, β-tubulin immunostaining in the cornea was blocked by Sema3a, and cell infiltration of β-tubulin in the cornea was detected. On the one hand, GVHD caused a lot of pain, while Sema3a blocked the symptoms of the whole body. The symptoms changed. The cause was analyzed. Wholemount corneal immunostaining showed that there was no significant difference in the dynamics of inflammatory cells, inflammatory cells, pathological changes, and pathological changes in the eyes of the cornea. The body difference between the symptoms and symptoms is very large. Now, please do so again. The treatment, injection and method were used to treat the pain in the extremities, oral administration, and intravenous injection.

项目成果

ドライアイモデルマウス角膜内の生体共焦点顕微鏡による経時的観察

使用活体共聚焦显微镜延时观察干眼模型小鼠角膜

• 发表时间: 2023
• 作者: 清水翔太;谷口ヒロ子;羽藤晋;平山雅敏;榛村重人;根岸一乃
• 通讯作者: 根岸一乃