Evaluating the role of the lymphatic system in regeneration of the Japanese Fire-bellied Newt (C. pyrrhogaster)

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イモリは高い組織再生能力を有しているが、その再生機構は未だ解明されていない。イモリはヒトと同様に発達したリンパ系を持つが、さらに体節に沿ってリンパ心臓と呼ばれるリンパ器官が存在する。予備実験では、このリンパ心臓が四肢の再生に寄与する可能性を見いだした。本研究では、リンパ系と組織再生の関係に着目し、以下の項目により、イモリのリンパの構造と機能を解明した。1) 成体イモリをマイクロサージャリーでリンパ管と静脈の接合部を切除する手術（リンパハート）と偽手術に割り付けたランダム化比較試験。術後の四肢の再生に両群間で有意差はなかった（P=0.77）。また、リンパ心切除後のイモリでは浮腫は生じなかった。2) 超高周波超音波、マイクロCTリンパ管造影、近赤外線リンパ管造影、3次元連続組織体積コンピュータ再構成、電子顕微鏡の各技術を用いて、成体イモリのリンパ管解剖の解明を試みた。その結果、静脈系に隣接して肋骨や椎骨を走る新規の骨内リンパ管が、リンパ心除去後の主要なリンパ流ドレナージシステムとして機能することを確認した。現在、この新しいネットワークの他の機能を詳細に検討している。3）再生リンパ管内の組織サンプルを採取し、免疫組織化学染色法を用いて再生途中のリンパ管、神経、血管を観察する予定である。これまで、CD31、LYVE-1、VEGFR-3など、哺乳類で確立されたいくつかの主要な血管分子マーカーを実験に応用することに成功した。しかし、リンパ管の運命の主な制御因子であるリンパ管特異的マーカーProx-1の発現を検索している。