マウス胎仔皮膚再生過程における線維芽細胞の移動のメカニズムの解析

小鼠胎儿皮肤再生过程中成纤维细胞迁移机制分析

• 批准号: 21K09778
• 负责人: 鎌田 将史
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09778/
• 关键词: 皮膚; 胎仔; 再生; 線維芽細胞

B6.129X1-Twist2tm1.1(cre)Dorと/J、とactinを重合し遊走に関わる葉状仮足を形成する低分子量Ｇタンパク質であるRacをコードするexon内にlox-P siteを有し、Creレコンビナーゼを発現する細胞でRacをノックアウトすることができるSTOCK Rac1tm1Djk/Jマウスをそれぞれ増殖させ、当研究室で交配させた。2種のマウスは交配するに十分な数が確保できたので、交配行い出産させることが可能であった。しかし、計150匹の胎仔のGenotypingを行った結果、Twist2Cre-lox-Pともに入ったマウスは出生が認められなかった。引き続き、交配を続けるとともに、マウスを一度若いwild typeのものと掛け合わせ、若返らせたのちに、再び交配を試みることとした。さらに、2023年度で行う予定であった線維芽細胞のin vitroでの動態の観察をwild typeを用いた真皮actin cableの形成と、各発生段階の胎仔から採取した線維芽細胞を用いてscratch assayを行い、細胞の遊走、収縮などの動態の変化を観察した。すなわち、マウスの胎仔真皮より線維芽細胞の初代培養を行い、2次元培養下scratch assayでのactin cableの形成、または偽足の形成を確認した。また、RacからRhoへの切り替えを引き起こす低分子化合物を投与することで、線維芽細胞でactin cable形成や遊走を制御できるか否かを観察した。

B6.129X1-Twist2tm1.1(cre)Dorと/J、actinを coincident and wandering Sekiko leaf-shaped foot を formation する low molecular weight タンパクquality であるRac をコードするexon inner にlox-P siteを有し、Creレコンビナーゼを発appearsするcellでRacをノックアウトすることができるSTOCK Rac1tm1Djk/Jマウスをそれぞれ multiply and reproduce and mate in the laboratory. 2 kinds of mating, mating, mating, and mating are possible.しかし, 150 pieces of のGenotypingを行った results, Twist2Cre-lox-P ともに入ったマウスはbirthがcognizeめられなかった. Hide き続き, mate を続けるとともに, マウスを once if いwild typeのものと hang け合わせ, if return らせたのちに, and again mate をtrial みることとした.さらに、2023年で行うdeterminedであった线dimensional sprout cellsのin vitroでのdynamicの観Observationをwild typeを用いたdermal actin The formation of cables and the fetuses at each growth stage were measured using a scratch assay to measure the movement of cells, the movement and contraction of cells, and the dynamic change of cells.すなわち, マウスのfetal dermal fibroblast cells were first cultured, scratch assay was performed for the formation of actin cable under 2-dimensional culture, and the formation of pseudopods was confirmed.また、RacからRhoへの Cutり为えをinducingき起こすLow molecular compound をinvestment することで、line-dimensional germ cell でactin The cable is formed as a control unit.