慢性創傷とNETs発現の関連の解明とNETｓをターゲットにした新規治療の開発

阐明慢性伤口与 NET 表达之间的关系以及开发针对 NET 的新疗法

• 批准号: 21K09806
• 负责人: 今川 孝太郎
• 金额: $ 2万
• 依托单位: Tokai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09806/
• 关键词: NETs; バトロキソビン; 皮弁虚血再灌流モデル; 難治性皮膚潰瘍; ＮＥＴｓ; カルプロテクチン染色; 慢性創傷; NETｓ; 慢性皮膚潰瘍

本研究は１．慢性創傷でのNETｓ発現の検討と２．動物モデルによるバトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証を行うものである。１．慢性創傷でのNETｓ発現についての検討２０２１年度に虚血性潰瘍、褥瘡４例について壊死部と健常部の境界から組織を採取したものを、NETｓ発現の確認としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色を施行した。肉眼的に炎症の強い症例にNETｓの集積が認められ、局所の炎症が強い部位が組織壊死へ伸展する可能性が示唆された。２．バトロキソビンのNETｓ抑制効果の検証動物実験はSD雄性ラット２４匹にて検討する予定である。ラットの腹部に5x3cmの浅腹壁動静脈を茎とする皮弁を挙上し、血管茎をクリップで６時間クランプした後に血流を再開させる皮弁虚血再灌流モデルを使用した。血管クランプ解除時、２４時間後にバトロキソビン30バトロキソビン単位/kgを腹腔内投与し（コントロール群は生理食塩水を腹腔内投与）、皮弁虚血再灌流後の壊死抑制効果を肉眼的および組織学的に検証する。２０２２年度は先行実験として６匹に対して施行した。評価は再灌流後７日目の変化を確認した。肉眼的評価評価として、レーザードップラー血流イメージング（LDI; Moor Instruments, Ltd., Devon, UK）を用いて皮弁の生存範囲を可視化した。組織学的評価としてカルプロテクチン（S100A8）染色、ミエロペルオキシダー染色によるNETｓ発現、血管との関連としてCD31染色を行った。現在、皮弁血流の測定データは、Moor LDI Main software (Laser Doppler Imager ver 5.3; Moor Instruments, Ltd.)を用いて解析、組織標本を作製中である。

This study youdaoplaceholder2 1. Chronic trauma で occurrence of で 検 seek と2. The inhibitory effect of animal モデ, によるバトロキソビ, によるバトロキソビ, <s:1>, on NETs 検 検 evidence を, う, <s:1>, である. 1. Chronic traumatic で の NETs 発 now に つ い て の 検 for 2021 に virtual hemorrhagic ulcers, 4 cases of bedsore に つ い て 壊 die department と health often department の realm か ら groups を adopting し た も の を, NETs 発 の now confirmed と し て カ ル プ ロ テ ク チ ン (S100A8) dyeing, ミ エ ロ ペ ル オ キ シ ダ ー dyeing を imposed し た. Cases strong macroscopic に inflammation の い に NETs の set product が recognize め ら れ bureau の inflammation, strong part い が が organization 壊 die へ stretch す が る possibility in stopping さ れ た. 2 Youdaoplaceholder0 the inhibitory effect of NETs in バトロキソビ 検 evidence animal experiment バトロキソビ SD male ラット24 にて検 for する determination である. ラ ッ ト の abdominal に 5 x3cm の shallow abdominal wall arteriovenous を stem と す る leather chemical を 挙 し, vascular stem を ク リ ッ プ で 6 time ク ラ ン プ し た に blood flow after open another さ を せ る leather chemical empty blood perfusion モ デ ル を use し た. Vascular ク ラ ン プ after lifting, 24 time に バ ト ロ キ ソ ビ ン 30 バ ト ロ キ ソ ビ ン 単 bit/kg を cast with intraperitoneal し (コ ン ト ロ ー ル group は physiological food salt water を cast with the abdominal cavity), leather chemical virtual blood perfusion again after の 壊 death inhibiting unseen fruit を naked eye お よ び histological に 検 card す る. In 2022, the <s:1> pilot test conducted と て 6-horsepower に against て carried out <s:1> た. Review: 価 価 reperfusion 7 days later を change を confirmed た. Macroscopic assessment 価 assessment of 価 と し て, レ ー ザ ー ド ッ プ ラ ー blood イ メ ー ジ ン グ (LDI; Moor Instruments, Ltd., Devon, UK) を with い て leather chemical の survival van 囲 を visualization し た. Histological evaluation 価 と し て カ ル プ ロ テ ク チ ン (S100A8) dyeing, ミ エ ロ ペ ル オ キ シ ダ ー dyeing に よ る NETs 発 now, blood vessels, と の masato even と し て CD31 staining line を っ た. Now, the blood flow of the skin sample is <s:1> measured デ デ タ タ デ, Moor LDI Main software (Laser Doppler Imager ver 5.3; Moor Instruments, Ltd.)を is used for デ て analysis, and tissue specimen を is being prepared である.