神経ペプチドCGRPは口腔癌の骨破壊を制御する新たな標的となり得るか？

本研究の目的は知覚神経由来の神経ペプチドであるCGRPが直接的あるいは間接的に癌細胞の増殖に与える影響を明らかにすることならびにCGRPが癌骨微小環境において癌細胞をとりまく細胞群（骨細胞、破骨細胞、血管内皮細胞、骨髄間質細胞など）に与える影響を明らかにすることである。これまでに、in vitroの実験で以下のことを確認している。１）口腔細胞株（HSC2，SAS）をCGRPあるいはCGRP拮抗阻害薬CGRP8-37の存在下で培養し、HSC2、SASともにCGRPによって細胞増殖は促進し、CGRP8-37添加により細胞増殖は抑制された。このことからCGRPは口腔癌細胞（HSC2, SAS）の増殖に直接的に作用していることが示唆される。２）樹立知覚神経細胞株F11をHCl添加にして作製した酸性環境で培養し、細胞内へのCa2+の流入を測定したところ、F11の興奮が惹起された。このことから、酸性環境は知覚神経興奮を誘発する。３）血管内皮細胞HUVECを用いてtube formation assayを行い、branching point、tube length、Netsを測定し、F11培養上清がpositive controlとして使用したVEGFと同等に強力にHUVECの管腔形成を誘導することを確認した。このことは、知覚神経から放出されるCGRPが血管新生を介して間接的に口腔癌細胞の増殖を誘導する可能性を示唆している。４）初代培養知覚神経細胞DRGにHSC-2およびSASの培養上清を添加し培養し、Calcein-AMで蛍光ラベルして可視化したところ、DRGの軸索延長が誘導されることを確認した。このことは口腔癌細胞が知覚神経の軸索延長を促進することを示唆している。以上の結果から、酸性環境は知覚神経を活性化させ、癌性疼痛を惹起する可能性が考えられる。また、知覚神経末梢から放出されるCGRPは血管新生を介して間接的に癌細胞の増殖を誘導する、あるいはCGRP受容体を介して直接的に癌細胞の増殖を促進する可能性があることが示唆される。

本研究の目的は知覚神経由来の神経ペプチドであるCGRPが直接的あるいは間接的に癌細胞の増殖に与える影響を明らかにすることならびにCGRPが癌骨微小環境において癌細胞をとりまく細胞群（骨細胞、破骨細胞、血管内皮細胞、骨髄間質細胞など）に与える影響を明らかにすることである。これまでに、in vitroの実験で以下のことを確認している。１）口腔細胞株（HSC2，SAS）をCGRPあるいはCGRP拮抗阻害薬CGRP8-37の存在下で培養し、HSC2、SASともにCGRPによって細胞増殖は促進し、CGRP8-37添加により細胞増殖は抑制された。このことからCGRPは口腔癌細胞（HSC2, SAS）の増殖に直接的に作用していることが示唆される。２）樹立知覚神経細胞株F11をHCl添加にして作製した酸性環境で培養し、細胞内へのCa2+の流入を測定したところ、F11の興奮が惹起された。このことから、酸性環境は知覚神経興奮を誘発する。３）血管内皮細胞HUVECを用いてtube formation assayを行い、branching point、tube length、Netsを測定し、F11培養上清がpositive controlとして使用したVEGFと同等に強力にHUVECの管腔形成を誘導することを確認した。このことは、知覚神経から放出されるCGRPが血管新生を介して間接的に口腔癌細胞の増殖を誘導する可能性を示唆している。４）初代培養知覚神経細胞DRGにHSC-2およびSASの培養上清を添加し培養し、Calcein-AMで蛍光ラベルして可視化したところ、DRGの軸索延長が誘導されることを確認した。このことは口腔癌細胞が知覚神経の軸索延長を促進することを示唆している。以上の結果から、酸性環境は知覚神経を活性化させ、癌性疼痛を惹起する可能性が考えられる。また、知覚神経末梢から放出されるCGRPは血管新生を介して間接的に癌細胞の増殖を誘導する、あるいはCGRP受容体を介して直接的に癌細胞の増殖を促進する可能性があることが示唆される。