口腔がんエピゲノム異常遺伝子の網羅的解析とエピゲノム薬による腫瘍抑制効果の検証

口腔癌表观基因组异常基因综合分析及表观基因组药物抑癌作用验证

• 批准号: 21K10121
• 负责人: 永易 裕樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10121/
• 关键词: 口腔がん; エピゲノム; DNA脱メチル化剤; DNAメチル化剤

本邦における口腔がん全体の原発巣再発率は13～30％で、口腔がん全体の5年生存率は60～70%であることから、治癒率向上のための新規治療法の開発が望まれる。本邦では、骨髄異形成症候群と皮膚T細胞性リンパ腫に対し、DNAメチル基転移酵素阻害剤（DNMTi）とヒストン脱アセチル化酵素阻害剤（HDACi）によるエピゲノム薬治療が臨床応用されているが、口腔がんへの応用には至っていない。本研究では、口腔がんのDNAメチル化異常とヒストンアセチル化異常の解析を行うことでエピゲノム異常遺伝子の同定を行い、DNMTiとHDACiの腫瘍抑制効果を検証する。今年度は昨年度の5-Azacytidineから、より毒性が低く化学的安定性が高いZebularine(Zebu)に変更し細胞培養実験を行った。高分化型舌扁平上皮癌細胞株HSC4を用いてDNMTiのZebuおよびHDACiのValproic acid(Vpa)添加によるHSC4の細胞増殖抑制を検討した後、HSC4にZebuとVpaを共添加し7日間培養を行い、次世代シーケンサーによるRNA発現網羅的解析を行った結果、対照群と比較し発現上昇を示した遺伝子の上位にがん抑制遺伝子CNTN4が確認された。次に、がん抑制遺伝子p16,p21,RASSF1,NPY ,CNTN4について定量的RT-PCR法を行った結果、Zebu・Vpa共添加群において有意なmRNA発現上昇を認めた。これらの遺伝子について定量的メチル化特異的PCR法を行った結果、Zebu・Vpa共添加群でのDNAメチル化率の有意な低下を認め、ZebuのDNA脱メチル化作用がmRNA発現上昇に影響したことが確認された。またin situ HDAC activity assayの結果、Zebu・Vpa共添加群において有意なHDAC活性低下を認め、Vpaの作用が効果を示したことが確認された。

In this state, the original rebirth rate is 13.30%, the 5-year survival rate is 60.70%, and the treatment rate is higher than that of the new regulations. In this country, the syndrome of bone disease is characterized by skin, bone disease, cellular disease, DNA, gene transfer enzyme block (DNMTi), chemical enzyme block (HDACi), chemical enzyme block (HDACi), and oral treatment. The purpose of this study is to analyze the behavior of the DNA, the oral cavity, the mouth, the mouth, the This year, last year, 5-Azacytidine, low toxicity, low chemical stability, high Zebularine (Zebu), cell culture, cell culture. After the highly differentiated cell line HSC4 of tongue flat epithelioma was treated with DNMTi Zebu colony HDACi cell Valproic acid (Vpa), HSC4 Zebu cell Vpa cell line was cultured within 7 days, and the results of the analysis of the RNA network were analyzed. According to the group comparison, now show that the upper level of the child suppresses the child CNTN4 to make sure that the child is not working. The results of RT-PCR method and Zebu Vpa added the results of quantitative RT-PCR method, and the results of Zebu ·Vpa added a total of groups of people who intended to mRNA. The results of the PCR method for quantitative characterization, Zebu ·Vpa total addition of the group "DNA", "intentional reduction", "Zebu" DNA de-activation, "mRNA" now have an impact on the performance of the system. In the results of in situ HDAC activity assay test, Zebu ·Vpa added a total of two groups: intentionally low HDAC activity, low HDAC activity, and low Vpa activity.

项目成果

Tumor inhibitory effect of epigenetic agents on oral squamous cell carcinoma.

表观遗传学药物对口腔鳞状细胞癌的抑瘤作用。

• 发表时间: 2022
• 作者: 丸山 智;山崎 学;阿部達也;田沼順一;Shuhei Takahahi
• 通讯作者: Shuhei Takahahi

口腔扁平上皮癌におけるエピゲノム薬の腫瘍抑制効果の検討

表观基因组药物对口腔鳞癌的抑癌作用研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 高橋 周平;吉田 光希;原田 文也;Ariwansa Dedy;Khurelchuluun Ariuntsetseg;Paudel Durga;平木 大地;森川 哲郎;植原 治;佐藤 惇;永易 裕樹;安彦 善裕
• 通讯作者: 安彦 善裕

口腔扁平上皮癌におけるエピゲノム薬の腫瘍抑制効果の検討.

表观基因组药物对口腔鳞状细胞癌的抑癌作用研究。

• 发表时间: 2022
• 作者: 黒川 聡司;柳生 貴裕;舟山 直希;今田 光彦;上山 善弘;今井 裕一郎;桐田 忠昭;大林史誠，小泉浩一，烏帽子田夏希，松山たまも，岡本健人，高橋秀明，三島健史，福谷多恵子，田口有紀，木村直大，伊藤奈七子，檜垣美雷，濱田充子，山崎佐知子，浜名智昭，吉岡幸男，谷亮治，林堂安貴，柳本惣市;高橋 周平
• 通讯作者: 高橋 周平

Demethylation effect of 5-Azacytidine on oral squamous cell carcinoma

5-氮杂胞苷对口腔鳞癌的去甲基化作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Koki Yoshida;Shuhei Takahashi;Fumiya Harada;Dedy Ariwansa;Ariuntsetseg Khurelchuluun;Durga Paudel;Daichi Hiraki;Tetsuro Morikawa;Osamu Uehara;Jun Sato;Yoshihiro Abiko;Hiroki Nagayasu
• 通讯作者: Hiroki Nagayasu