Elucidation of the function of platelet aggregation factor podoplanin in distant metastasis of oral cancer

阐明血小板聚集因子平足蛋白在口腔癌远处转移中的作用

• 批准号: 21K10125
• 负责人: 山近 重生
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10125/
• 关键词: ポドプラニン; anoikis; 遠隔転移

癌の転移には、癌細胞が細胞同士や細胞外基質との接着性を失った後も生存を維持できるためのanoikis回避機構が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では、このanoikis回避機構と高転移性の腫瘍細胞に高発現が認められ、血小板凝集作用を有するポドプラニンとの関係に着目し、ヒト口腔扁平上皮癌細胞株を用いて、ポドプラニン発現量と血小板活性および凝集性との相関、ポドプラニン発現量とSCIDマウスでの肺転移形成率および造腫瘍性との相関につき検討を行ってきた。検討にはヒト舌癌由来細胞株（HSC-2）、ヒト舌扁平上皮癌由来細胞株（HSC-3）、ヒト舌癌由来細胞株（SAS）を用い、ポドプラニン発現量と血小板活性および血小板凝集性との相関を検討した結果を参考に、ポドプラニン発現細胞株に対してsiRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。続いて、樹立したポドプラニン発現抑制株とそれぞれの親株を健常人の血液から調整した多血小板血漿Platelet Rich Plasma（PRP）またはADPにより活性化させた血小板存在下において共培養し、それぞれの細胞株の①血小板凝集性、②生存率、③細胞増殖、④細胞浸潤、⑤anoikisの差違、⑥血小板活性化因子の差違について血小板非存在下で培養したものとの比較検討を予定していた。ポドプラニン低発現細胞株に対しては、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入し、ポドプラニン安定発現株を樹立する予定であったが、各細胞株のポドプラニン発現量に大きな有意差が認められず、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入した細胞株との比較においても安定した結果が得られなかったため、本検討においては、siRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。

据认为，厌氧避免机制在癌症转移中起着重要作用，以确保癌细胞即使在细胞和细胞外基质之间失去粘附性后也可以维持生存。 In this study, we focused on the relationship between this anoikis avoidance mechanism and podoplanin, which has high expression in highly metastatic tumor cells and has platelet aggregation effect, and examined the correlation between the expression level of podoplanin, platelet activity and aggregation, and the correlation between the expression level of podoplanin and lung metastasis formation rate in SCID mice, and tumorigenicity. We used human tongue cancer-derived cell lines (HSC-2), human tongue squamous cell carcinoma-derived cell lines (HSC-3), and human tongue cancer-derived cell lines (SAS), and used the results of investigating the correlation between podoplanin expression levels, platelet activity and platelet aggregation, and attempted to establish a podoplanin-expressing cell lines using siRNA.接下来，我们计划在存在富含血小板的血浆（PRP）或富含血小板的血浆（PRP）或从健康个体的血液中激活的血小板血浆（PRP）或ADP激活的既定的podoplanin表达抑制菌株和每个母体压力，或者是从健康个体的血液中激活的ADP，并比较1）血小板聚集的差异，2）血小板的差异，2）5）细胞plulivatious，3）3）生存率，4）3），4）4）3），4）4）。在没有血小板的情况下，每个细胞系的血小板激活因子与血小板的差异。对于低表达岩肽的细胞系，引入了含有人脉球蛋白基因的表达载体来建立稳定的podopoplanin表达菌株，但是在每个细胞系中的Podopoplanin表达量中没有显着差异，并且在与人类podoppodin podin pod in pod pod a pod a pod a pod a pod a的表达中未获得稳定的结果，因此，在我们中均未获得稳定的结果。使用siRNA应变。