Elucidation of the function of platelet aggregation factor podoplanin in distant metastasis of oral cancer

阐明血小板聚集因子平足蛋白在口腔癌远处转移中的作用

• 批准号: 21K10125
• 负责人: 山近 重生
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10125/
• 关键词: ポドプラニン; anoikis; 遠隔転移

癌の転移には、癌細胞が細胞同士や細胞外基質との接着性を失った後も生存を維持できるためのanoikis回避機構が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では、このanoikis回避機構と高転移性の腫瘍細胞に高発現が認められ、血小板凝集作用を有するポドプラニンとの関係に着目し、ヒト口腔扁平上皮癌細胞株を用いて、ポドプラニン発現量と血小板活性および凝集性との相関、ポドプラニン発現量とSCIDマウスでの肺転移形成率および造腫瘍性との相関につき検討を行ってきた。検討にはヒト舌癌由来細胞株（HSC-2）、ヒト舌扁平上皮癌由来細胞株（HSC-3）、ヒト舌癌由来細胞株（SAS）を用い、ポドプラニン発現量と血小板活性および血小板凝集性との相関を検討した結果を参考に、ポドプラニン発現細胞株に対してsiRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。続いて、樹立したポドプラニン発現抑制株とそれぞれの親株を健常人の血液から調整した多血小板血漿Platelet Rich Plasma（PRP）またはADPにより活性化させた血小板存在下において共培養し、それぞれの細胞株の①血小板凝集性、②生存率、③細胞増殖、④細胞浸潤、⑤anoikisの差違、⑥血小板活性化因子の差違について血小板非存在下で培養したものとの比較検討を予定していた。ポドプラニン低発現細胞株に対しては、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入し、ポドプラニン安定発現株を樹立する予定であったが、各細胞株のポドプラニン発現量に大きな有意差が認められず、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入した細胞株との比較においても安定した結果が得られなかったため、本検討においては、siRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。

Cancer metastasis, cancer cell co-existence, extracellular matrix adhesion, survival, anoikis avoidance, and important organ function. In this study, we investigated the relationship between anoikis avoidance mechanism and high expression of platelet aggregation in highly migratory tumor cells, and the correlation between platelet aggregation and high expression of platelet activity in oral squamous cell carcinoma cell lines. The relationship between the expression of siRNA and platelet activity and platelet aggregation was studied in HSC-2, HSC-3 and SAS cell lines. The results showed that the expression of siRNA in HSC-2, HSC-3 and SAS cell lines was significantly different from that in HSC-2 and SAS cell lines. In the presence of platelets, the cell lines were co-cultured in the presence of activated platelets, including platelet aggregation, viability, cell proliferation, cell infiltration, and anoikis. 6. The difference of platelet activation factors in the absence of platelet culture was determined. The low expression cell lines were introduced and stable expression cell lines were established. The expression of low expression cell lines was significantly different from that of low expression cell lines. The expression of low expression cell lines was significantly different from that of low expression cell lines. The present study aims to investigate the use of siRNAs to inhibit the development and establishment of the strain.