Elucidation of the function of platelet aggregation factor podoplanin in distant metastasis of oral cancer

阐明血小板聚集因子平足蛋白在口腔癌远处转移中的作用

• 批准号: 21K10125
• 负责人: 山近 重生
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10125/
• 关键词: ポドプラニン; anoikis; 遠隔転移

癌の転移には、癌細胞が細胞同士や細胞外基質との接着性を失った後も生存を維持できるためのanoikis回避機構が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では、このanoikis回避機構と高転移性の腫瘍細胞に高発現が認められ、血小板凝集作用を有するポドプラニンとの関係に着目し、ヒト口腔扁平上皮癌細胞株を用いて、ポドプラニン発現量と血小板活性および凝集性との相関、ポドプラニン発現量とSCIDマウスでの肺転移形成率および造腫瘍性との相関につき検討を行ってきた。検討にはヒト舌癌由来細胞株（HSC-2）、ヒト舌扁平上皮癌由来細胞株（HSC-3）、ヒト舌癌由来細胞株（SAS）を用い、ポドプラニン発現量と血小板活性および血小板凝集性との相関を検討した結果を参考に、ポドプラニン発現細胞株に対してsiRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。続いて、樹立したポドプラニン発現抑制株とそれぞれの親株を健常人の血液から調整した多血小板血漿Platelet Rich Plasma（PRP）またはADPにより活性化させた血小板存在下において共培養し、それぞれの細胞株の①血小板凝集性、②生存率、③細胞増殖、④細胞浸潤、⑤anoikisの差違、⑥血小板活性化因子の差違について血小板非存在下で培養したものとの比較検討を予定していた。ポドプラニン低発現細胞株に対しては、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入し、ポドプラニン安定発現株を樹立する予定であったが、各細胞株のポドプラニン発現量に大きな有意差が認められず、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入した細胞株との比較においても安定した結果が得られなかったため、本検討においては、siRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。

The migration of cancer cells, the survival and maintenance of cancer cells, and the loss of adhesion to the extracellular matrixきるためのanoikis avoidance mechanism がimportantなservice cut を Fruit たしていると卡えられている. This study focuses on the recognition of the presence of highly migrating tumor cells in the avoidance mechanism of the disease. The effect of platelet aggregation is related to the relationship between platelet aggregation and oral squamous cell carcinoma cell lines. Use いて, ポドプラニン発精品 and platelet activity およびagglutination とのrelated, ポドプラニン発精品The rate of pulmonary metastasis caused by SCID is related to the formation of tumors and ulcers. Tongue cancer-derived cell line (HSC-2), Tongue squamous cell carcinoma-derived cell line (HSC-3), Tongue cancer-derived cell line (SAS), and Tongue cancer-derived cell line Platelet activity, platelet aggregation, and platelet aggregation are related to the results and reference. The current cell line of siRNA was established and tested using the current inhibitor strain of いたポドプラニン発. Platelet Rich Plasma (PRP) activated ADP co-cultured in the presence of platelets, cell line ① Platelet aggregation, ② survival rate, ③ cells Cell proliferation, ④ cell infiltration, ⑤ anoikis の difference, ⑥ platelet activating factor の difference に つ い て culture in the absence of platelets し た も の と の 検 Discussion を conditioned し て い た.ポドプラニンlow 発appears the cell strain に対しては, ヒトポドプラニン伝子を有する発appears ベクターを import し, ポドプThe stable and stable strains are established and the cells are established and the cell lines are established.ず、ヒトポドプラニン缝子を有する発行ベクターを Imported したcell lineとのComparison においても stabilization したresultがWe have tested the establishment of inhibitory strains using siRNA and siRNA inhibitors.