Elucidation of the function of platelet aggregation factor podoplanin in distant metastasis of oral cancer

阐明血小板聚集因子平足蛋白在口腔癌远处转移中的作用

• 批准号: 21K10125
• 负责人: 山近 重生
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tsurumi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10125/
• 关键词: ポドプラニン; anoikis; 遠隔転移

癌の転移には、癌細胞が細胞同士や細胞外基質との接着性を失った後も生存を維持できるためのanoikis回避機構が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では、このanoikis回避機構と高転移性の腫瘍細胞に高発現が認められ、血小板凝集作用を有するポドプラニンとの関係に着目し、ヒト口腔扁平上皮癌細胞株を用いて、ポドプラニン発現量と血小板活性および凝集性との相関、ポドプラニン発現量とSCIDマウスでの肺転移形成率および造腫瘍性との相関につき検討を行ってきた。検討にはヒト舌癌由来細胞株（HSC-2）、ヒト舌扁平上皮癌由来細胞株（HSC-3）、ヒト舌癌由来細胞株（SAS）を用い、ポドプラニン発現量と血小板活性および血小板凝集性との相関を検討した結果を参考に、ポドプラニン発現細胞株に対してsiRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。続いて、樹立したポドプラニン発現抑制株とそれぞれの親株を健常人の血液から調整した多血小板血漿Platelet Rich Plasma（PRP）またはADPにより活性化させた血小板存在下において共培養し、それぞれの細胞株の①血小板凝集性、②生存率、③細胞増殖、④細胞浸潤、⑤anoikisの差違、⑥血小板活性化因子の差違について血小板非存在下で培養したものとの比較検討を予定していた。ポドプラニン低発現細胞株に対しては、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入し、ポドプラニン安定発現株を樹立する予定であったが、各細胞株のポドプラニン発現量に大きな有意差が認められず、ヒトポドプラニン遺伝子を有する発現ベクターを導入した細胞株との比較においても安定した結果が得られなかったため、本検討においては、siRNAを用いたポドプラニン発現抑制株の樹立を試みた。

Cancer cell transfer, cancer cell proliferation, extracellular gene adhesion, maintenance of survival after failure, maintenance of critical care in the anoikis avoidance mechanism. In this study, anoikis avoidance mechanism was used to detect cell proliferation, platelet agglutination, oral squamous cell carcinoma cell line, platelet activity, platelet activity and platelet agglutination. The formation rate of lung metastasis was measured by SCID measurement. Cell lines of tongue cancer (HSC-2), squamous cell carcinoma of tongue (HSC-3), cell line of tongue carcinoma (SAS), platelet activity assay, platelet agglutination assay, platelet The growth rate of the cell strain was significantly higher than that of the control strain (siRNA). The suppressor strain was tested. The suppressor strain was detected in normal human blood, Platelet Rich Plasma (PRP), ADP, activation, platelet coculture, platelet aggregation, cell line 1 platelet aggregation, 2 survival rate, 3 cell colonization, 4 cell immersion, 5anoikis differential, and so on. (6) Platelet activating factor (PAF) in the absence of platelet activation factor (PAF). The cell line is low, the cell is low. The results showed that the growth rate of the suppressor plant was significantly higher than that of the control group. The results showed that the growth rate of the suppressor plant was significantly higher than that of the control group. The results showed that the growth rate of the suppressor plant was significantly higher than that of the control group. The results showed that the growth of the suppressor plant was detected. The results showed that the suppressor plant was successfully established.