口腔常在菌のreplaceによる歯周病予防ツールの開発

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本研究は口腔常在菌のreplaceによるバイオフィルム形成抑制効果について検討し、口腔バイオフィルムの健全化による歯周病予防ツール開発を最終目的とする。本年度は歯周病原細菌４菌種を用いて、歯根上へのバイオフィルム形成を試みた。さらに、人工バイオフィルムの経時的変化を確認した。使用菌株はPorphyromonas gingivalis (P. g) ATCC33277、Tannerella forsythia (T. f) ATCC43037、Treponema denticola (T. d) ATCC35405、Fusobacterium nucleatum（F. n）ATCC 25586、Streptococcus gordonii (S. g) ATCC10558である。バイオフィルム形成には、0.1％ N-acetylmuramic acid添加TYGVS 培地を用い、昨年度と同様の方法でヒト歯・歯根の切片上に行った。はじめにODを1.0に調整したS.g懸濁液を、被験切片が設置された容器内に満たし、24時間培養した。次いで懸濁液を除去し、各ODを1.0に調整したP. g、T. f、T. dとF. nの懸濁液を被験切片が設置された容器内に入れ、さらに嫌気条件下（90％N2、５％CO2）で24時間培養した。バイオフィルムの観察はSEMにて行った。また、菌叢解析はOD 0.5、1.5の各細菌懸濁液を用いた人工バイオフィルムについても試みた。SEM観察の結果、５菌種すべてがセメント質上に付着し、バイオフィルム形成が確認された。菌叢解析から人工バイオフィルムの成熟度および細菌密度の違いによって、動態が異なることが明らかになった。人工バイオフィルムを用いたシミュレーションを行うにあたっては細菌密度の条件などさらなる検討が必要であると考えられた。