Crosstalk between Netrin-1 and BMP regulates the invasion and metastasis of melanoma

点击翻译按钮获取中文摘要

悪性黒色腫は皮膚や口腔を含む粘膜に発症する悪性腫瘍であり，早期より全身転移するため予後が悪い．Netrin-1は神経細胞の軸索を誘引する液性因子として同定され，多くの悪性腫瘍でNetrin-1の発現量が上昇し，さらにNetrin-1が腫瘍細胞の遊走・浸潤を促進することが報告されている．Netrin-1と受容体のDCCではメラノーマ細胞の挙動において相反した作用を持つが，そのメカニズムの解明は不十分であり，さらに他のNterin-1受容体，すなわちDSCAMやNeoを対象とした研究も進んでいなかった．そこで実験的にNetrin-1の過剰発現でBMPの補助受容体としても知られるNeoの発現が上昇し，またNtrin-1の過剰発現はBMPが誘導するId-1のレポーター活性を濃度依存性に亢進させた．さらに今年度は実験対象を若干拡大させて，Src シグナルの制御因子に着目してその悪性黒色腫の機能を解析した. Srcシグナルの調節因子plectin遺伝子が欠損したマウス悪性黒色腫細胞株B16細胞（PKO）を作製し，ヌードマウスにPKOを接種し2週間後形成された腫瘍を形態学・組織学的に解析した．するとPKO腫瘍細胞の密度は低く，H＆E染色ではPKO腫瘍の細胞間隙は広く疎な像であった．同様にPKO細胞から形成されたスフェロイドでは凝集密度が低下し，PKOの細胞塊は機械的刺激によって容易に崩壊した．また，フィブロネクチンに対する接着能も低下した．さらに，PKOの細胞増殖能をWST-8法およびCell viability法で評価したところ，PKOは経時的な生細胞数の増加能が低下していた．Western botting法と免疫沈降法により解析すると，PKOではSrcシグナル活性が低下していた．