細胞種ごとに異なる発現パターンを示す小胞体内イオン輸送体の生理学的意義の解明

阐明内质网离子转运蛋白的生理意义，根据细胞类型显示不同的表达模式

• 批准号: 20K07256
• 负责人: 村田 喜理
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07256/
• 关键词: 小胞体; 膜輸送; イオンチャネル

小胞体内のイオン組成が小胞体機能や疾患の発症に重要な役割を果たすことが明らかとなりつつあるにも関わらず、小胞体内のイオン組成およびその調節機構に は依然、不明な点が多い。本研究では、小胞体に発現するイオン輸送体の種類が;細胞種ごとに異なることの生理学的意義の解明を目指す。 そのためにまず、pHをはじめとした小胞体内のイオン組成について、外分泌細胞、B細胞など細胞種ごとに測定を行う。本計画では小胞体に局在させた種々のイ オンに対するタンパク質性蛍光プローブを用いて、小胞体内腔のイオン濃度の測定を行う。蛍光プローブをHEK293細胞に導入して観察を行ったところ、想定よりも蛍光強度が低く、測定が困難であった。現在、発現量を増やすなどの改変を試みつつ、異なるテーマに取り組んでいる。小胞体内に局在するように改変したタンパク質性の蛍光pHプローブ mCherrySEpHluorinを発現させたHEK293細胞からnuclear envelope標本を作成し、外液(細胞質側)のpH、イオン 組成を変化させたときの、小胞体内のpH変化をpHluorinとmCheryの蛍光強度比の変化から、小胞体内のpH変化を観察した。その結果、nuclear envelope内側のK+イオン、外側のKClがnuclear envelope内の酸性化に寄与することが示唆された。薬理学実験の結果、nuclear envelope内のK+イオンはK+-H+交換輸送体によるH+イオンの外惻への輸送を阻害することにより、また、外側のKClは内側のK+イオンの供給源として機能し、それぞれ内側の酸性化を促進していることが示唆された。

The cytoskeleton in the small cell can be used to treat the disease and the disease. The results show that the organ is still in operation, and the information is not clear. In this study, small cell bodies were used to understand the meaning of physiology. The cytokines in the cells of microcysts were determined by Elisa, pH, exocrine and B-cell culture. In this project, the microsomal apparatus is used to determine the performance of the microsomal apparatus and the lumen of the small cell. The light intensity of the HEK293 cell is low, the light intensity is low, and the light intensity is low. At present, we need to make sure that we can improve the quality of the system and improve the quality of the system. In the cytosol, the light intensity ratio of the pH cell was changed and mCherrySEpHluorin was detected. The nuclear envelope tag of the cell was made, the pH of the external fluid (cell), the composition of the cell, the light intensity ratio of the pH, the pHluorin and the mChery in the cell, and the pH in the cell were observed. The results of the test, the results of the nuclear envelope, the internal acidification of the KCl and the nuclear envelope, and the instigation of the results. The results of the experiment, the nuclear envelope system, the transmission system, the transport system, the transmitter, the transmitter

项目成果

Periodontal ligaments enhance neurite outgrowth in trigeminal ganglion neurons through Wnt5a production induced by mechanical stimulation

牙周膜通过机械刺激诱导 Wnt5a 的产生增强三叉神经节神经元的神经突生长

• DOI: 10.1152/ajpcell.00302.2022
• 发表时间: 2022
• 期刊: American Journal of Physiology-Cell Physiology
• 影响因子: 5.5
• 作者: Takahashi Kaori;Yoshida Takashi;Wakamori Minoru
• 通讯作者: Wakamori Minoru

Mode-selective inhibitory effects of eugenol on the mouse TRPV1 channel

丁子香酚对小鼠 TRPV1 通道的模式选择性抑制作用

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2021.03.126
• 发表时间: 2021
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Commun
• 作者: K. Takahashi;T. Yoshida;M. Wakamori
• 通讯作者: M. Wakamori

核膜におけるH+透過機構の薬理学的検討

H+核膜渗透机制的药理学研究

• 发表时间: 2023
• 作者: 村田喜理;石原陽;加藤雅規
• 通讯作者: 加藤雅規