The development of method to activative immune tolerance involved in fertility

父親由来胎児組織抗原に対する母体の免疫反応は、胎盤に集積した制御性T細胞(Treg）により抑制されることで妊娠が維持されている。オウギ及びオウギ配合漢方薬（防己黄耆湯、帰耆建中湯、黄耆建中湯、桂枝加黄耆湯）が妊娠を維持するか調査するため、6週令BALB/c雌性マウスにこれらエキスを14日間自由摂取させた。４日間の休薬後コンカナバリンAを投与し、７日後にイソフルランにより安楽死させ脾臓を摘出した。脾臓から得た脾細胞は溶血後に固定透過し、各種蛍光標識抗体で染色した。フローサイトメトリーにより、リンパ球中のTreg含有率（CD4+CD25+Foxp3+Treg）、抑制性サイトカインIL-10陽性Treg含有率（CD4+Foxp3+IL-10+Treg）、T細胞抑制抗原CTLA-4陽性Treg含有率（CD4+Foxp3+CTLA-4+Treg)、細胞障害性Th17含有率(CD4+IL-17+Th17)を測定・分析した。さらに、6週令BALB/c雌性マウスにオウギ及び桂枝加黄耆湯エキスを14日間自由摂取させた後、10週令BALB/c雄性マウスと交配し、産仔数をコントロール群と比較した。コントロールと比較し、オウギはTreg、CD4+Foxp3+IL-10+Tregの有意な増加、CD4+Foxp3+CTLA-4+Tregの有意な減少、Th17の有意な増加を示した。また、オウギは濃度依存的に産仔数を増加させたが、オウギ配合漢方薬のうちリンパ球中のTreg含有率を最も増加させた桂枝加黄耆湯は産仔数増加を示さず、これはCD4+Foxp3+CTLA-4+Tregを有意に増加させT細胞活性化を抑制したことが原因と考えられた。

父親由来胎児組織抗原に対する母体の免疫反応は、胎盤に集積した制御性T細胞(Treg）により抑制されることで妊娠が維持されている。オウギ及びオウギ配合漢方薬（防己黄耆湯、帰耆建中湯、黄耆建中湯、桂枝加黄耆湯）が妊娠を維持するか調査するため、6週令BALB/c雌性マウスにこれらエキスを14日間自由摂取させた。４日間の休薬後コンカナバリンAを投与し、７日後にイソフルランにより安楽死させ脾臓を摘出した。脾臓から得た脾細胞は溶血後に固定透過し、各種蛍光標識抗体で染色した。フローサイトメトリーにより、リンパ球中のTreg含有率（CD4+CD25+Foxp3+Treg）、抑制性サイトカインIL-10陽性Treg含有率（CD4+Foxp3+IL-10+Treg）、T細胞抑制抗原CTLA-4陽性Treg含有率（CD4+Foxp3+CTLA-4+Treg)、細胞障害性Th17含有率(CD4+IL-17+Th17)を測定・分析した。さらに、6週令BALB/c雌性マウスにオウギ及び桂枝加黄耆湯エキスを14日間自由摂取させた後、10週令BALB/c雄性マウスと交配し、産仔数をコントロール群と比較した。コントロールと比較し、オウギはTreg、CD4+Foxp3+IL-10+Tregの有意な増加、CD4+Foxp3+CTLA-4+Tregの有意な減少、Th17の有意な増加を示した。また、オウギは濃度依存的に産仔数を増加させたが、オウギ配合漢方薬のうちリンパ球中のTreg含有率を最も増加させた桂枝加黄耆湯は産仔数増加を示さず、これはCD4+Foxp3+CTLA-4+Tregを有意に増加させT細胞活性化を抑制したことが原因と考えられた。