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Mechanism of palmitic acid-induced diabetic endothelial dysfunction via O-GlcNAc

棕榈酸通过 O-GlcNAc 诱导糖尿病内皮功能障碍的机制

基本信息

批准号：
20K08503
负责人：
眞崎暢之
金额：
$ 2.83万
依托单位：
National Defense Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

今回、細胞数の限界から細胞採取方法を変更した。冠動脈バイパス手術患者の同意を得て手術に立ち会う。術中にバイパスグラフト血管の余剰となる断端を受け直ちに血管内皮細胞を剥離する処理を行うことで十分な血管内皮細胞数を確保する。本法は既に、防衛医大倫理委員会の承認を得て、公開データベース登録済みである。現在までに17人の心臓バイパス手術患者から大伏在静脈グラフト断端を採取し、血管内皮細胞浮遊液を冷凍保存している。細胞浮遊液からフローサイトメトリーによって血管内皮細胞検出を行っており、死細胞を除去後に、血管内皮細胞CD31、CD146抗原陽性、かつリンパ球細胞CD45抗原陰性を同時に示す細胞群を認めている。このまま安定して細胞を保存、検出できる実験系を確立しソーティングによって血管内皮細胞のみを取り出して網羅的なmRNA解析を行う方針である。本研究では、冠動脈バイパス手術が必要な動脈硬化が進行した患者同士を糖尿病の有無で2群に分けて比較しmRNAの差を調査する。まず、血管内皮細胞に特異的なマーカーを検出し、実験系が確立できれば、ヘキソサミン経路の酵素について計測を行う。

This time, the number of cells is limited, and the method of selecting cells is more accurate. The patients agreed to receive a meeting of the surgical staff. During the operation, the cut-off end of the vascular endothelial cell was isolated from the blood vessel during the operation, and the number of endothelial cells was guaranteed. In this Law, the committee of the Medical University of Preventive Medicine will recognize the award and register it in public. At present, there are 17 patients who are suffering from cardiac surgery, and the endothelium of blood vessels are cryopreserved with cytosol. The cell floatation fluid was used to detect the expression of CD31, CD146 antigen and CD45 antigen in vascular endothelial cells, dead cells were removed, and the cell population was detected at the same time. To make sure that the vascular endothelial cell is out of the Internet, the mRNA parser is used to analyze the data. In this study, there are two groups of patients with diabetes who have lower mRNA levels than those with diabetes mellitus in this study. The expression of enzymes in vascular endothelial cells is different from that of vascular endothelial cells.