Immunological accommodation, Treg/Breg and co-stimulatory signal in ABO-incompatible kidney transplantation

ABO 不相容肾移植中的免疫调节、Treg/Breg 和共刺激信号

• 批准号: 20K09573
• 负责人: 齋藤 和英
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K09573/
• 关键词: ABO血液型不適合腎移植; 免疫学的順応; 免疫寛容; 共刺激分子; 制御性B細胞; 制御性T細胞

2020年度はIn vitroの抗血液型抗体産生定量モデルにおけるリンパ球サブセット解析予備実験を行なった。健常人対照末梢血からPBMCを分離し我々が設定した条件（2.5%ヒトAB血清, rIL12，rIL15添加AIMV培地）で培養しフローサイトメトリー（FCM）解析条件設定を行った。各々CD3,CD4,CD8をT細胞、CD19,CD20をB細胞、CD38,CD138を形質細胞マーカーとして解析するための染色・FCM実施の至適条件を検討した。更にPD-1,PD2,PD-L1,PD-L2,CTLA4を共刺激因子マーカー、CD25,FoxP3をTreg, IL-10,CD5,CD1dhi,TIM1,IL-10をBregマーカーとしFCM実施のしてき条件を検討した。T,B細胞条件設定は順調に進んだが、共刺激因子、Treg,Breg染色とFCM条件設定には既存論文報告条件を参考にしたがヒト末梢血では対象細胞数が少なく再現性を持って条件設定することがかなり困難であることがわかった。上記と並行しABO血液型不適合腎移植患者からリンパ球供与を受けるための研究計画書、患者説明同意書を作成し本学倫理委員会の審査承認を受けた。2021年度は患者から同意を得て末梢血を採取し上記の健常人検体で設定した条件下での細胞解析を開始したが、免疫抑制療法を受けている患者の抹消血リンパ球数は極端に少なく、十分な解析が行えない患者も多数おり、解析に難渋した。さらに2021、2022年度には当施設所有のフローサイトメーターが複数回故障し、経費と時間（コロナ禍の影響もあり修繕業者の依頼にも相当な時間が経過）をかけて修繕したにも関わらず、再び故障を繰り返し、研究遂行が何度も中断せざるを得なかった。修繕費用と時間の関係で研究期限内で結果を出すことが困難な状況となり研究費執行の期限を1年間延期申請して現在に至った。

2020 は In vitro の resistance to blood type antibody generation quantitative モ デ ル に お け る リ ン パ ball サ ブ セ ッ ト parsing reserve be 験 を line な っ た. The healthy human polices according to peripheral blood か ら PBMC を separation し I 々 が set し た conditions (2.5% ヒ ト AB serum, rIL12, rIL15 add AIMV petty) で cultivate し フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー line (FCM) analytical conditions set を っ た. Each 々 CD3, CD4, CD8, CD19 を T cells, CD20 を B cells, CD38, CD138 を character cell マ ー カ ー と し て parsing す る た め の staining, FCM の be applied to the optimum condition を 検 beg し た. More に PD 1, PD2, PD - L1, PD - L2, CTLA4 を were stimulating factor マ ー カ ー, CD25, FoxP3 を Treg, IL - 10, CD5, CD1dhi, TIM1, IL - 10 を Breg マ ー カ ー と し FCM be applied の し て き conditions を beg し 検 た. T and B cells conditions setting は shun に into ん だ が, stimulating factor, Treg Breg dyeing と FCM conditions set に は を reference existing theses conditions に し た が ヒ で ト peripheral blood は like cells was less が な seaborne く reproducibility を hold っ て conditions set す る こ と が か な り difficult で あ る こ と が わ か っ た. The above is recorded as と and the ABO blood type is not suitable for kidney transplantation. The patient is らリ パ パ donor and を received けるため. The research plan and the patient's consent form are を. It is reviewed and recognized by the expert ethics committee. Youdaoplaceholder6 received けた. 2021 patients with は か ら agree to を を て peripheral blood taken し written の set the healthy normal 検 body で し た conditions で の analytical を cells start し た が, immunosuppressive therapy を け て い る patients の effacement blood リ ン パ count は less extreme に な く line, very な analytic が え な も い patients most お り, analytical に 渋 し た. さ ら に 2021, 2022 annual に は when facilities all の フ ロ ー サ イ ト メ ー タ ー が complex fault し back, 経 と time (コ ロ ナ disaster の influence も あ り repair industry の in 頼 に も quite な time が 経) を か け て repair し た に も masato わ ら ず, again び fault を Qiao り return し what degree, the research carries out が も interrupt せ ざ る を must な か っ た. Time to renovate と の masato で findings period で を out す こ と が difficult condition な と な り study fees apply の deadline extension を 1 years し て に now to っ た.

项目成果

Hyporesponsiveness against donor's ABO antigens of renal grafts after ABO-incompatible kidney transplantation

• DOI: 10.1007/s10157-022-02280-3
• 发表时间: 2022-10-08
• 期刊: CLINICAL AND EXPERIMENTAL NEPHROLOGY
• 影响因子: 2.3
• 作者: Tasaki，Masayuki;Tateno，Hiroaki;Tomita，Yoshihiko
• 通讯作者: Tomita，Yoshihiko