2光子励起顕微鏡を用いた膵癌細胞の血行性肝転移時の肝内動態と転移巣形成の研究

双光子激发显微镜研究胰腺癌细胞血行肝转移过程中的肝内动力学和转移灶形成

• 批准号: 20K16359
• 负责人: 成澤 裕子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K16359/
• 关键词: 2光子励起顕微鏡; 膵癌; 血行性肝転移

マウスの脾臓内へ膵癌細胞を移植する血行性肝転移モデルを用い、肝臓内での膵癌細胞と血管との相互関係や時間経過での変化について、2光子励起顕微鏡によって観察する。7週齢、108週齢の雄性C57BL/6マウスを用い、イソフルラン吸入麻酔下にて脾臓を体外へ露出し、70kDa Dextranとマウス膵癌細胞株 (GFP発現、Hoechst染色済)の混合液0.1 mLを脾臓内へ注入した。注入後30分以内に体外へ露出した肝臓を吸引型マウス固定装置（吸引圧約30mmHg）にて吸引固定して視野を確保した。2光子励起顕微鏡にて70kDa Dextranで描出された肝臓の血管内にマウス膵癌細胞が観察できた。観察開始から2分ごとのタイムラプス動画を0.5～1時間撮影し、マウス膵癌細胞の動きを観察した。今回の観察では、7週齢、108週齢のマウス共に、脾内移植した癌細胞は、血流にのって肝臓までは流れてきたが、肝内では血管内に留まり、ほとんど動かずに血管壁に留まっている癌細胞が多く観察できた。さらに、肝臓表面から100μmの深さまでの３D画像を取得し、血管分岐と癌細胞がその血管内にどれくらいとどまっているのかを評価した。その結果、7週齢と108週齢のマウスを比較すると、7週齢のマウスのほうが肝臓内に留まっている癌細胞が多かった。肝臓内の血管を週齢にて比較してみると、肝臓全体の血管としては108週齢のマウスの血管のほうが、7週齢のマウスの血管よりも太く、血管の分岐も多く認められた。これらの特徴が膵癌における血行性肝転移の成立のしやすさに関与している可能性がある。

Transplantation of cancer cells in the spleen and blood vessels in the liver are observed by microscopy. The relationship between cancer cells and blood vessels in the liver is observed by microscopy. Male C57BL/6 cells at 7 and 108 weeks of age were injected with 0.1 mL of a mixture of 70kDa dextran and 70kDa Dextran in vitro. After injection, the patient was exposed to the outside of the body within 30 minutes. The suction type fixation device (suction pressure about 30mmHg) was used to ensure the suction fixation. 2-photon excitation microscopy revealed that 70kDa Dextran was present in the blood vessels of the liver. The detection starts at 2 minutes, and the detection starts at 0.5 to 1 minutes. In the present study, we observed that at 7 weeks and 108 weeks, cancer cells were transplanted into the spleen, blood flow in the liver, blood vessels in the liver, and blood vessels in the liver. 3D images of the liver surface at depths of 100μm were obtained, and vascular bifurcation and cancer cells were evaluated. The results showed that there were more cancer cells in the liver after 7 weeks and 108 weeks. The blood vessels in the liver are divided into two groups: the first group is 108 weeks old, the second group is 7 weeks old, and the third group is 108 weeks old. The characteristics of this disease include the possibility of hematogenous liver metastasis.

项目成果

2 光子顕微鏡を用いた自家蛍光による未染色生細胞・組織の形態的解析

使用双光子显微镜使用自发荧光对未染色的活细胞和组织进行形态学分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 北山和道;河本旭哉;原仁美;川上洋平;竹森俊幸;藤原周一;八尋俊輔;宮本智弘;黒田良祐;秋末敏宏;成澤裕子，山川けいこ，安西駿士，横平政直，松田陽子
• 通讯作者: 成澤裕子，山川けいこ，安西駿士，横平政直，松田陽子

Comparison of the effect of culture medium on unfixed rat pancreatic tissue in two-photon excitation microscopy

双光子激发显微镜下培养基对未固定大鼠胰腺组织的影响比较

• DOI: 10.46459/pmu.2020004
• 发表时间: 2020
• 期刊: Personalized Medicine Universe
• 作者: Nakano-Narusawa Yuko;Yamakawa Keiko;Ye Juanjuan;Yokohira Masanao;Matsuda Yoko
• 通讯作者: Matsuda Yoko

2光子顕微鏡を用いた自家蛍光による未染色生細胞・組織の形態的解析

使用双光子显微镜使用自发荧光对未染色的活细胞和组织进行形态学分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 成澤 裕子;山川 けいこ;安西 駿士;横平 政直;松田 陽子
• 通讯作者: 松田 陽子

2光子顕微鏡を用いた自家蛍光による未染色生細胞の形態的解析

使用双光子显微镜通过自发荧光对未染色的活细胞进行形态学分析

• 发表时间: 2020
• 作者: 成澤 裕子;山川 けいこ;横平 政直;松田 陽子
• 通讯作者: 松田 陽子

2光子励起顕微鏡を用いたネオアジュバント療法後の膵癌における間質線維化の検討

使用双光子激发显微镜检查胰腺癌新辅助治疗后的间质纤维化

• 发表时间: 2021
• 作者: Shinkawa Tomohiko;Ohuchida Kenoki;Mochida Yuki;Sakihama Kukiko;Iwamoto Chika;Abe Toshiya;Ideno Noboru;Mizuuchi Yusuke;Shindo Koji;Ikenaga Naoki;Moriyama Taiki;Nakata Kohei;Oda Yoshinao;Nakamura Masafumi;葉娟娟，成澤裕子，山川けいこ，横平政直，岡野圭一，鈴木康之，松田陽子
• 通讯作者: 葉娟娟，成澤裕子，山川けいこ，横平政直，岡野圭一，鈴木康之，松田陽子