非病原性天疱瘡抗体を用いた治療分子とセツキシマブによる口腔癌治療モデルの開発

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非病原性デスモグレイン(Dsg)3抗体を用いた治療分子PX44TRAILとセツキシマブ(C-mab)による口腔癌治療モデルの開発を目指す上で、C-mab低感受性OSCC細胞のPx44TRAILとC-mab、カルシウム(Ca)の組み合わせ投与の効果について、細胞増殖能とアポトーシス誘導能をWST-1、Annexin V　assayで確認した。C^mab、Px44TRAIL、Ca各単独投与が2％、30％、35％であるのに対し、それらを全て組み合わせると72％と効果が最も高かった(投与なしと比較した効果の上昇率)。C-mab、CaはともにDsg3発現を上昇させることから、その効果の上昇にDsg3が関与していると考えられるため、Dsg3を発現変動させた際などの効果の変化を確認する予定である。前年度の結果より、Dsg3はOSCCの足場環境で発現が変わり、足場依存性環境(AD)である原発巣では低い方が、足場非依存性環境(AID)である転移リンパ節では高い方が細胞増殖能が上昇することが示唆された。同一患者の原発巣と転移リンパ節から樹立された6種類の細胞株においてAD、AIDでDsg3をノックダウンしたところ、細胞増殖能がADで上昇した。AIDでは低下することが予想されたが変化を認めなかった。そこで足場環境によりDsg3と関連して変動する遺伝子の影響が考えられたため、各足場環境でDsg3をノックダウンしたときの発現変動遺伝子(DEGs)をRNA-seqによって抽出し、Gene Otology解析(GO解析)を行った。ADではDsg3ノックダウンにより、細胞運動性に関する遺伝子(ITGAなど)の上昇がみられたが、AIDでは細胞シグナルに関連する遺伝子(MMPなど)の上昇を認め、足場環境によりDSGsが異なることが示唆された。それらの遺伝子の発現を変動させた際の影響を調べる予定である。