权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

糸球体上皮細胞におけるPDK1の役割と腎機能への影響の解析

PDK1在肾小球上皮细胞中的作用分析及其对肾功能的影响

基本信息

批准号：
20K17302
负责人：
岩田和希子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Center for Global Health and Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

糖尿病性腎症の発症・進展における糸球体上皮細胞(podocyte)でのインスリンシグナル伝達系の関与について検討するため、インスリンシグナル伝達系の最重要因子であるPDK1のpodocyteにおける活性に着目し、podocyte特異的PDK1 KOマウスを作製・評価を行った所、PDK1 KOマウスでは生後早期からタンパク尿が出現し腎不全死にいたることを見出した。次に、その病態メカニズムを解明するため、我々は転写因子FoxO1に着目し、podocyte特異的PDK1-FoxO1欠損マウスを作製・評価を行った所、腎不全死は阻止出来なかった。そこで本研究では、PDK1欠損により生じる腎機能障害の原因となる分子を同定し糖尿病性腎症の新たな標的因子の探索を行なった。尿細管においてFoxO3aが腎保護に働くという報告より、他のFoxOファミリー分子による病態への寄与を考え、我々はpodocyte特異的PDK1-FoxO3a欠損マウス(FoxO3aDKO)を作製した。Pdk1-floxホモマウスとfoxo3a-floxホモマウスとの交配によりpdk1 & foxo3aダブルfloxホモマウスを作製後、podocyte 特異的　Cre recombinase Tgマウスとの交配によりFoxO3aDKOを作製し、それらのマウスの尿および血液の採取を行い生化学的解析を行なった。また、分子機序解明としてPdk1-floxホモマウスから単離した初代培養podocyteにアデノ随伴ウイルス「AAV Cre recombinase」を感染させPdk1遺伝子の発現を消失させた際の発現変動因子解析のためにAAV Cre recombinaseを作製した。

The most important factor in the development and progression of diabetic kidney disease is the activity of PDK1 in podocytes, which is the most important factor in the development and progression of diabetic kidney disease. In addition, we can also use PDK1-FoxO1 as a control and evaluation tool to prevent kidney failure. This study is aimed at exploring new molecular markers for diabetic nephropathy, which may contribute to the pathogenesis of renal dysfunction due to PDK1 deficiency. Report on the renal protection of FoxO3a in urine tubules, the pathological nature of his FoxO molecule, and the production of the podocyte-specific PDK1-FoxO3a damage control system (FoxO3aDKO). Pdk1-flox The molecular mechanism of Pdk1-flox gene expression was clarified. The expression of Pdk1 gene was detected by AAV Cre recombinase in primary culture of podocyte.