エクソソームを用いた2型糖尿病の病態・治療効果予測に有用な新規マーカーの探索

利用外泌体寻找可用于预测 2 型糖尿病的病理学和治疗效果的新标记物

• 批准号: 20K17521
• 负责人: 江戸 直樹
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Teikyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17521/
• 关键词: ２型糖尿病; プロテオーム解析; 診断マーカー; 治療マーカー; エクソソーム

本研究は、2型糖尿病患者血清から新規方法により単離した高純度エクソソームのプロテオーム解析を行い、糖尿病の病態・治療と関連して発現変化を示すタン パクを同定する。発現変化を確認後、より簡便な検出が可能と期待されるタンパクに候補を絞り、当該候補タンパクについて検出システムを構築し、多検体で測 定を行うことにより、病態・治療効果予測における臨床的有用性を検証する。その上で2型糖尿病の診断・治療に役立つ新規バイオマーカーを同定し、将来的な 実用化に向けた基盤的な知見を得ることを目的としたものである。2022年度は、候補タンパクについて複数の健常人で存在することを確認した。2020年度に未治療2型糖尿病患者のペア血清を用いてPSアフィニティー法により高純度エクソソームを精製・回収し、回収したエクソソームをトリプシン消化 し、LC-MS/MSシステム質量分析計でラベルフリー定量法によるプロテオーム解析を実施した。このプロテオーム解析で同定された候補タンパクについて、2021年 度は(プロテオーム解析まで行わずとも)ウェスタンブロットなどのより簡便な方法で検出可能かどうかについて、健常人血清を用いて評価を行った。その結果、数個の候補タンパクについて、超遠心法やカラムによる回収といった、より簡便なエクソソーム回収法でもウェスタンブロットなどで検出できるタンパクで あることがわかり、候補タンパクを絞ることができた。当該候補タンパクについて、非糖尿病患者複数で存在が確認され、現在、２型糖尿病患者の血糖コントロール状況との関連を確認している。

This study is aimed at identifying the relationship between the development of diabetes mellitus and the development of a new method for the analysis of serum samples from patients with type 2 diabetes. After confirmation of discovery, simple detection, possible and expected candidate selection, construction of system when candidate selection, determination of multiple models, clinical usefulness evaluation of pathological and therapeutic effect prediction. For the diagnosis and treatment of type 2 diabetes, new rules have been established to determine the future use of diabetes and to determine the basic knowledge. In 2022, the number of healthy people in the candidate list was confirmed. In 2020, the serum of untreated patients with type 2 diabetes mellitus will be purified by PS and purified by HPLC, and analyzed by LC-MS/MS mass spectrometry. The analysis of this topic is the same as that of the candidate list for the year 2021 (the analysis of the topic list is the same as that of the year 2021). The result is that several candidates are selected, the ultra-remote center is selected, the return is selected, and the simple and easy return method is selected. When the candidate status is determined, a plurality of non-diabetic patients are identified, and a correlation between the blood glucose status and the type 2 diabetic status is identified.