敗血症関連脳症の機序解明およびグルタチオンによる抗酸化作用関与の解析

脓毒症相关脑病发病机制阐明及谷胱甘肽抗氧化作用分析

• 批准号: 20K17822
• 负责人: 小林 賢礼
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K17822/
• 关键词: 敗血症関連脳症; GSH; メタボローム解析; 敗血症; 英文投稿; 論文掲載; Cyclophilin D ノックアウトマウス; グルタチオン; 抗酸化作用; Cyclophilin D

本研究では酸化ストレス耐性を持つであろうCypD KOマウスを用いてSAEモデルを作製することで、GSH/CypD/SIRT3情報伝達系という新たな切り口からGSHの抗酸化作用を分析するとともに、GSH生成のためのxCTの機能解析を進めることで、CypD ・MPTを介したミトコンドリア機能不全とSIRT3を介したミトコンドリア保護機構の役割解明に展開し、クライオ電子顕微鏡によるMPTporeの構造解析を行うことで未知のMPTporeの役割解明に繋げることから新規脳保護法確立を独創的かつ創造的に目指している。SAE発症によるROS産生とGSHの抗酸化作用の機序解明およびxCTの機能解析と併せてGSH/CypD/SIRT3情報伝達系の果たす役割の解明に対して、第10～16週令の雄性C57B6 wildマウスをwild群、CypD KOマウス群を用いてSAEモデルを作製し、モデル作製0, 6, 18時間（各時間・両群とも5匹のマウスを使用）後の脳サンプルを用いてWestern BlottingなどによるxCT蛋白の発現解析やメタボローム解析を行った。また、xCTの機能解析としては、システイン供給経路としてN-Acetyl-Lcysteine (NAC)投与群を作製しxCT蛋白の発現解析、CLP処置後の生存率と病理学的解析を行い、GSH/xCT/CypD情報伝達系の役割解明を目指した。メタボローム解析を主軸として、GSHの抗酸化作用およびCypD KOマウスとの関係性からミトコンドリア機能不全との関連が推察され、英文投稿および掲載達成でき、学位取得に帰結された。ただし、NAC投与群に関しては、敗血症モデル作製の不正確性か、あるいはNACの腹腔内投与の不正確性の影響か、予想され得る成果とは離れた結果となってしまい、因果関係を考察し研究継続している。

In this study, we analyzed the anti-acidification effect of GSH/Cyp D/SIRT3 information transmission system, and analyzed the function analysis of GSH generation and XCT. The structure analysis of MPTpore in electronic micromirrors is carried out in order to understand the unknown MPTpore structure. The new protection method is established in order to create the original design. Sequence Analysis of ROS Production and GSH Antiacidification in SAE Pathogenesis and Functional Analysis of XCT and GSH/CypD/SIRT3 Information System After 18 hours (each time group is used), the protein expression of xCT protein is analyzed by Western Blotting. The function analysis of xCT, the function analysis of N-Acetyl-Lcystine (NAC), the function analysis of xCT protein, the survival rate after CLP treatment, the analysis of pathology, and the analysis of GSH/xCT/CypD information system are also discussed. The relationship between GSH anti-acidification and Cyp D KO anti-acidification was investigated. The impact of NAC's investment on the community, the illegality of blood poisoning, the impact of the illegality of NAC's intraperitoneal administration, the expected results and the inconsistent results, and the investigation and research of causality.