子宮内膜菲薄化モデルマウスに対するPDE5阻害薬の効果と作用機序の解明

阐明PDE5抑制剂对子宫内膜变薄模型小鼠的作用及其机制

基本信息

批准号：
20K18164
负责人：
西岡美喜子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

生殖補助医療では、体外受精技術が飛躍的に進歩した一方で、体外受精後子宮内に胚移植した後の妊娠率は30％程度に止まっており改善に乏しい。我々は着床不全や不育症の中でも、子宮内膜発育不全症に対する治療法の開発を目指して、血流改善効果が報告されているPhosphodiesterase(PDE)5阻害薬のTadalafilに着目した。本研究では、エタノール注入による子宮内膜発育不全モデルマウスの作成法を確立し、Tadalafilの投与により子宮内膜が肥厚化するかを確認し、その理由として子宮内膜での血流改善効果と炎症性macrophageへの抗炎症作用が影響しているかを確認する。そしてその際の着床・妊娠率を検討する事で、妊娠の成立維持における知見を得ると共に、新規治療法の創出を目指す。モデルマウスは外科的に子宮の卵巣側両側と膣を専用クリップで止め、30G針で95%エタノール溶液を子宮内に直接投与して5分間静置したのちにPBSで洗浄した。その結果2、4、6週と経時的に、子宮サイズが縮小すると共に、内膜上皮細胞は消失し間質細胞で充填された。次にモデルマウスにTadalafil投与を2、4週と継続して投与した所、内膜上皮細胞は認められず、多数の血管新生が認められた。今後は血流改善効果を確認するため、血管新生マーカーとしてVEGFR2、血流改善に関与する因子である酸化ストレスのマーカー8-OHdGを、低酸素誘導因子マーカーとしてHIF1αとHIF2α発現を確認する。加えて細胞の増殖とマクロファージの局在を確認するため、Ki67とF4/80についても免疫染色を進めている。

在辅助生殖医学中，虽然体外受精技术已大大提高，但在体外受精后胚胎转移到子宫后的妊娠率仍保持在30％左右，因此很难改善。我们专注于他达拉非，磷酸二酯酶（PDE）5抑制剂，据报道，尽管植入失败和不育，但旨在为子宫内膜生长功能障碍而开发一种治疗方法。在这项研究中，我们将建立一种用乙醇注射以防止子宫内膜发育的小鼠模型的方法，并确认他达拉非的给药是否会使子宫内膜增厚，并确认改善子宫内膜和抗炎对炎症性巨噬细胞影响的影响是否有效。通过检查目前的植入和妊娠率，我们旨在获得维持怀孕和创造新疗法的知识。用特殊夹子将模型小鼠手术分流，并用特殊的夹子分流，然后使用30克针直接将95％的乙醇溶液施用到子宫中，然后静置5分钟，然后用PBS洗涤。结果，随着2、4和6周的时间，子宫尺寸减少，内膜上皮细胞消失并充满基质细胞。接下来，将他达拉非连续给予模型小鼠2或4周，并且未发现子宫内膜上皮细胞，并观察到大量的新生血管化。将来，为了确认改善血流的效果，VEGFR2将用作血管生成标记物，8-OHDG（氧化应激的标记）8-OHDG，这是改善血液流动的因素，HIF1α和HIF2α表达将用作诱导低氧因素标志物。此外，还针对KI67和F4/80进行免疫染色，以确认细胞增殖和巨噬细胞定位。

项目成果

期刊论文数量（14）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

精子運動解析装置「Lens Hooke」を用いた精子の評価および受精・発生率との関連性

使用精子活力分析仪“Lens Hooke”评估精子及其与受精和发病率的关系

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
植村碧;寺田堅斗;武内大輝;東本誠也;福井愛実;前沢忠志;高山恵里奈;西岡美喜子;渡邉純子;二井理文;北野裕子; 阪本美登;池田智明
通讯作者：
池田智明

精子自動分析装置Lens Hookeの有用性の検討

检查自动精子分析仪 Lens Hooke 的实用性

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
寺田堅斗;武内大輝;東本誠也;真柄栄梨;福井愛実;奥原彩也香;前沢忠志;西岡美喜子;高山恵理奈;渡邊純子;阪本美登;池田智明寺田堅斗;武内大輝;東本誠也;真柄栄梨;福井愛実;奥原彩也香;前沢忠志;西岡美喜子;高山恵理奈;渡邊純子;阪本美登;池田智明
通讯作者：
池田智明

胚移植前の経膣的黄体ホルモン製剤投与が妊娠予後に与える影響について

胚胎移植前阴道注射黄体酮对妊娠预后的影响