がん患者のための妊孕性温存における卵細胞傷害の原因と改善方法の究明

本研究では、AYA世代を含めた若年がん患者の妊孕性温存療法として行われている卵子凍結の治療成績を向上させることを目指しており、最終目標は妊孕性温存療法の一つである卵巣組織凍結時に得られる未熟卵子を体外培養し、成熟卵子を獲得する技術の確立である。本研究では、成熟卵子における細胞障害の原因究明として、凍結・融解ストレスによるミトコンドリア動態に関連した障害を検討した。2021年度に使用していた共焦点レーザー顕微鏡ZEISS LSM 500によって撮影した結果では、マウス新鮮・凍結融解成熟卵子におけるMT・TMRE染色後、ミトコンドリアのクラスター分布及びその面積を解析した結果は、両者でクラスター数に有意差は認めないが、クラスターあたりの面積は増大することが明らかになった。しかし、2021年度に実施したデータはあくまでも2D撮影におけるデータであり、体積評価をすることで大きくデータが異なるのではないかという疑問が残った。2022年度の研究成果としては、2022年には大学院共同研究施設にて、ZEISS LSM 900 with Airyscan 2という新規の共焦点レーザー顕微鏡を購入予定であったため、3D撮影におけるデータ解析を行い、2Dにおけるデータ解析と共に3Dにおけるデータ解析が同様の結果をもたらす結果となるかどうかについて検討を行った結果、2D及び3Dにおけるデータ解析共に、マウス新鮮・凍結融解成熟卵子におけるMT・TMRE染色後、ミトコンドリアのクラスター分布及びその面積、体積を解析した結果は、両者でクラスター数に有意差は認めないが、クラスターあたりの面積は増大すると言う同様の結果を得ることができた。現在サンプル数を増やし、得られたデータに齟齬がないか確認中である。

本研究では、AYA世代を含めた若年がん患者の妊孕性温存療法として行われている卵子凍結の治療成績を向上させることを目指しており、最終目標は妊孕性温存療法の一つである卵巣組織凍結時に得られる未熟卵子を体外培養し、成熟卵子を獲得する技術の確立である。本研究では、成熟卵子における細胞障害の原因究明として、凍結・融解ストレスによるミトコンドリア動態に関連した障害を検討した。2021年度に使用していた共焦点レーザー顕微鏡ZEISS LSM 500によって撮影した結果では、マウス新鮮・凍結融解成熟卵子におけるMT・TMRE染色後、ミトコンドリアのクラスター分布及びその面積を解析した結果は、両者でクラスター数に有意差は認めないが、クラスターあたりの面積は増大することが明らかになった。しかし、2021年度に実施したデータはあくまでも2D撮影におけるデータであり、体積評価をすることで大きくデータが異なるのではないかという疑問が残った。2022年度の研究成果としては、2022年には大学院共同研究施設にて、ZEISS LSM 900 with Airyscan 2という新規の共焦点レーザー顕微鏡を購入予定であったため、3D撮影におけるデータ解析を行い、2Dにおけるデータ解析と共に3Dにおけるデータ解析が同様の結果をもたらす結果となるかどうかについて検討を行った結果、2D及び3Dにおけるデータ解析共に、マウス新鮮・凍結融解成熟卵子におけるMT・TMRE染色後、ミトコンドリアのクラスター分布及びその面積、体積を解析した結果は、両者でクラスター数に有意差は認めないが、クラスターあたりの面積は増大すると言う同様の結果を得ることができた。現在サンプル数を増やし、得られたデータに齟齬がないか確認中である。