歯肉上皮細胞の防御システムへのゼノファジーの貢献

异噬对牙龈上皮细胞防御系统的贡献

• 批准号: 20K18522
• 负责人: 伊崎 佳那子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K18522/
• 关键词: 歯肉溝上皮細胞; オートファジー; ゼノファジー; LC3; Beclin-1; LPS; 擦過上皮細胞; 歯周病菌; p62

本年度は、歯肉溝における細菌感染と歯肉溝上皮細胞とのゼノファジーを介した相互作用を検索した。検索方法は、ボランティアから細胞診法を応用して歯肉溝およびコントロール群として遊離歯肉から擦過上皮細胞を採取して材料とした。上皮細胞での細菌感染の程度はパパニコロウ染色およびギムザ染色を行い、擦過上皮細胞内での細菌数から、ボランティアを感染群と非感染群に分けてゼノファジー発現の検索を行なった。また、一部の試料からタンパク抽出を試みた。細菌感染とゼノファジーの関連性については、免疫細胞染色(ICC)およびWestern blotting (WB)法により検討を行った。具体的には、感染群と非感染群で（１）歯周病菌感染に関連した因子の検索。（２）オートファジーおよびゼノファジーの誘導検索として、LC3およびBeclin-1(BECN1)抗体を用いて上皮細胞での発現を確認した。検索結果として、コントロール群からの擦過上皮細胞においては、上皮細胞への細菌感染は歯肉溝上皮と比較してひじょうに少なく、LPS関連因子およびオートファジー関連因子の発現も低かった。一方、歯肉溝上皮においては感染群と非感染群でLPSおよびオートファジー関連因子の発現に明らかな違いが認められた。まず、非感染群に比較して、感染群においてはLPS関連因子の発現亢進が明らかであった。この結果は、感染群での細菌感染程度の強さを表していると考えた。また、オートファジー因子に関しては、LC3-II発現は感染群と非感染群の上皮細胞において発現の相違は明らかではなかった。しかしながら、LC3-IIとギムザによる細菌塊の二重染色においてオートファゴゾームが細菌を取り込んでいる傾向が認められた。すなわち、感染群上皮細胞においてはゼノファージが亢進していると推測された。さらに、BECN1発現は感染群上皮細胞で有意に亢進していた。

This year, the meat is infected by bacteria, the epithelial cells of the meat are infected, and the interaction is introduced. The method was used to obtain the material by scrubbing the epithelial cells of the meat. The degree of infection of epithelial cells, the degree of bacterial infection, the degree of epithelial cell infection, the degree of bacterial infection, the number of bacteria in the epithelial cells, the number of bacteria in the non-infected group, the number of cells in the non-infected group. One movie, one movie. Bacterial infection was detected by immunocytochemical staining (ICC). Western blotting (WB) method was used to detect bacterial infection. Specific infection group, infection group and non-infection group. (1) Peripheral bacterial infection is related to factors. (2) the antibodies against LC3 and Beclin-1 (BECN1) were confirmed by the detection of epithelial cells. Results the results showed that the epithelial cells were scrubbed by the epithelial cells, the epithelial cells were infected by bacteria, the epithelium of the meat was less than that of the meat, and the LPS factor was significantly lower than that of the control group. One side, the meat epithelium, the infected group, the non-infected group, the LPS group, the infected group, the non-infected group, the non-infected group, the infected group, the non-infected group, The infection rate was higher in the non-infected group and the infected group than in the non-infected group, and the LPS factor was significantly higher in the infected group than in the non-infected group. The results of the results and the degree of infection of the infected group were strongly expressed in the table. The infected group, the non-infected group, the epithelial cell and the epithelial cell of the infected group and the non-infected group showed that the cells of the infected group, the non-infected group, the epithelial cell, the epithelium, the epithelium, the epi The bacteria were stained with double staining, the bacteria were stained twice, the bacteria were stained twice, and the bacteria were collected. The epithelial cells of the infected group were infected. The epithelial cells of the infected group were hyperactive. It was found that the epithelial cells of infected groups were intentionally hyperactive in patients with chronic hepatitis B and BECN1 infection.