外傷歯根破折に対する治癒因子の解析と低出力超音波パルスによる新規治療法の確立

申請者は学位論文において受傷２週以降の破折歯根の治癒過程を明らかにし、外傷により歯根成長の停止あるいは成長途上での歯根吸収を惹起する可能性を示した。しかしながら、歯根破折の治癒に関与する因子は未だ明らかにされていない。そこで、本研究の目的は、この現状を打破するため、歯根破折後の治癒を促進または阻害する因子を解析し、外傷受傷歯を正常な状態へ誘導する新たな治療法へと結びつけられないか、をテーマとし、歯根破折の治癒を病理組織学的ならびに分子生物学的に定量的に解明し、治癒に関与する分子を誘導して修復を促すような新しい治療法へ展開することを最終目標としている。令和４年度は改良した外傷作製装置を使用して全身麻酔下の５週齢ラットの左右上顎第一臼歯の口蓋側方向に 960 g の外力を 20 秒間与え、２週間 LIPUS 照射を行い、安楽死後、上顎骨を摘出した。上顎骨はマイクロ CT 撮影と病理組織切片の作製を行い、歯根形成状態と歯根破折の有無を判定した。結果として、明瞭な歯根破折を確認することができたため、今後の計画として、歯根や骨形態を観察するために、受傷後２週と３週の安楽死５日前にカルセインを投与、その３日後にテトラサイクリンを投与し、川本法による厚さ５μm の凍結切片を作製する。二重蛍光ラベルと細胞染色から骨形態計測法を用いて硬組織新生量や歯根形成量ならびに形成・吸収のパラメーターを算出する。出現する細胞を解析するためにヘマトキシリン・エオジン染色やトルイジンブルー染色を、硬組織細胞を解析するために TRAP 活性 (破骨細胞系) と ALP 活性 (骨芽細胞系) のマーカー二重染色、その他各種抗体を使用した免疫染色も行い、LIPUS 照射の有無によって発現する組織や細胞の違いを評価する予定である。

申請者は学位論文において受傷２週以降の破折歯根の治癒過程を明らかにし、外傷により歯根成長の停止あるいは成長途上での歯根吸収を惹起する可能性を示した。しかしながら、歯根破折の治癒に関与する因子は未だ明らかにされていない。そこで、本研究の目的は、この現状を打破するため、歯根破折後の治癒を促進または阻害する因子を解析し、外傷受傷歯を正常な状態へ誘導する新たな治療法へと結びつけられないか、をテーマとし、歯根破折の治癒を病理組織学的ならびに分子生物学的に定量的に解明し、治癒に関与する分子を誘導して修復を促すような新しい治療法へ展開することを最終目標としている。令和４年度は改良した外傷作製装置を使用して全身麻酔下の５週齢ラットの左右上顎第一臼歯の口蓋側方向に 960 g の外力を 20 秒間与え、２週間 LIPUS 照射を行い、安楽死後、上顎骨を摘出した。上顎骨はマイクロ CT 撮影と病理組織切片の作製を行い、歯根形成状態と歯根破折の有無を判定した。結果として、明瞭な歯根破折を確認することができたため、今後の計画として、歯根や骨形態を観察するために、受傷後２週と３週の安楽死５日前にカルセインを投与、その３日後にテトラサイクリンを投与し、川本法による厚さ５μm の凍結切片を作製する。二重蛍光ラベルと細胞染色から骨形態計測法を用いて硬組織新生量や歯根形成量ならびに形成・吸収のパラメーターを算出する。出現する細胞を解析するためにヘマトキシリン・エオジン染色やトルイジンブルー染色を、硬組織細胞を解析するために TRAP 活性 (破骨細胞系) と ALP 活性 (骨芽細胞系) のマーカー二重染色、その他各種抗体を使用した免疫染色も行い、LIPUS 照射の有無によって発現する組織や細胞の違いを評価する予定である。