Flectobacillus属の糸状化細菌による捕食環境センシング技術の確立

利用曲杆菌属丝状菌建立捕食环境传感技术

• 批准号: 20K21023
• 负责人: 中村 寛治
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Tohoku Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-07-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K21023/
• 关键词: 糸状化細菌; 捕食; センシング; Flectobacillus; 大腸菌; 蛍光遺伝子; 薬剤耐性遺伝子

Flectobacillus属細菌の選択的な検出を目指し，昨年度から継続して，Flectobacillus属細菌への蛍光タンパク遺伝子および薬剤耐性遺伝子の染色体への導入を試みた。本年度は，接合する条件（温度や接合用の培地）を変化させて検討を行った。しかしながら，目的の，蛍光タンパク遺伝子および薬剤耐性遺伝子の染色体への導入には至らなかった。これらの実験結果から，Flectobacillus属細菌のみでは，捕食センシング技術確立に向けた検討が困難であると判断した。そこで，対策として標準的な比較菌株を作成し，その標準株と混合して，相対的な被捕食性の検討を開始した。具体的には，昨年度作成したEscherichia coli K-12株の組換え体，２株，Escherichia coli K-12-TGF（緑色蛍光タンパクを保有し、テトラサイクリン耐性）およびEscherichia coli K-12-KRF（赤色蛍光タンパクを保有し、カナマイシン耐性）を利用し，原生動物との接触によって捕食抵抗性を取得する条件検討を行い，捕食抵抗性獲得のプロセス等を明示した。また，本研究成果を基に，論文投稿を行った。現在審査過程にある今後は，2株のFlectobacillus属細菌，Escherichia coli K-12-TGFおよびEscherichia coli K-12-KRFの利用を前提とした捕食実験を行い，総合的な捕食環境評価手法の確立を進めていく。

为了选择性地检测氟杆菌的细菌，我们继续将荧光蛋白基因和耐药基因引入自去年以来的氟杆菌细菌为染色体。今年，我们通过更改加入条件（加入温度和媒体）进行了一项研究。然而，未将所需的荧光蛋白基因和耐药性基因引入染色体中。基于这些实验结果，确定仅使用Flectobacillus属细菌研究捕食传感技术将很难研究。因此，作为对策，制备标准比较菌株并与标准菌株混合以开始研究相对捕食。具体而言，重组大肠杆菌K-12菌株，两种菌株，大肠杆菌K-12-TGF（携带绿色荧光蛋白，抗四环素抗性）和大肠杆菌K-12-kRF（通过携带红色荧光蛋白，kanamycin的抵抗），并在上一年进行了抗性，并在探测的范围内，这些方法是在均可使用的，均可及其抗性的依据，这些方法是在抗测试中的，并且是抗抗性的。清楚地说明了获得捕食抗性。此外，根据这项研究的结果提交了论文。将来，目前正在审查过程中，我们将根据使用两种菌株Flectobacillus，Escherichia coli k-12-TGF和Escherichia Coli K-12-KRF进行捕食实验，以建立一种全面的方法来评估掠夺环境。

项目成果

Grazing resistance developed in Escherichia coli K-12 during coexistence with a bacterivorous protist

大肠杆菌 K-12 在与食菌原生生物共存期间产生了放牧抗性

• 发表时间: 2022
• 作者: 富田 敦之;津田 翔太;宮川 拓己;平山 秀樹;髙島 祐介;直井 美貴;永松 謙太郎;Kanji Nakamura
• 通讯作者: Kanji Nakamura