植物の根における高解像度な元素濃度分布および遺伝子発現マップの作成

创建植物根部高分辨率元素浓度分布和基因表达图

• 批准号: 20K21264
• 负责人: 神谷 岳洋
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-07-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K21264/
• 关键词: 細胞層; 根; イオノーム

本研究は、植物の根の各細胞層を単離する簡便な方法を確立し、細胞層ごとの遺伝子発現量と元素濃度の分布を図示することを目的としている。昨年度に引き続き、根の細胞層特異的にストレプトタグ付き（コンストラクトはシグナル配列、細胞膜一回 膜貫通ドメイン、蛍光タンパク質（mCherry)）遺伝子を形質転換した植物の作成を進めた。これまでに、恒常的発現二種類、細胞層特異的発現三種類を作成し、全てについて独立した２０系統を鉢上げして種をとり、抗生物質耐性により分離比を確認、3:1分離する系統を複数得ている。現在、これらのうち、耐性株を鉢上げし、種子の収穫を待っている。形質転換植物のホモ系統を確立と並行して、作成したタグ付きコンストラクトが植物体内で機能する検討を開始した。植物からプロトプラストを単離し、恒常的に発現するプラスミドを導入し、mCherryの蛍光を確認した。このプラスミドを導入したプロトプラスを用いて、ストレプトタグに結合するアビジンを用いた精製条件の確立を進めた。プロトプラストを破壊しないようなバッファー組成を決定することができた。

The aim of this study was to establish a simple method for the separation of plant roots from each other, and to show the distribution of element concentrations in cell layers. In the past year, the root cell layer-specific structure of the plant has been improved. This is a system that produces two types of constant occurrence, three types of cell layer-specific occurrence, 20 types of independent occurrence, 20 types of antibiotic resistance, 3:1 separation ratio, and a plurality of isolation ratios. Now, wait for the harvest, wait for the harvest, wait for the harvest. The physical transformation of plants is established in parallel, and the functional transformation of plants is initiated. Plant growth and development is a constant phenomenon. The first step is to establish the conditions for improving the quality of the products. The decision was made on the composition of the organization.