Investigation on Molecular Mechanisms of Liver Diseases Caused by Hepatitis B and D Viruses Coinfection

点击翻译按钮获取中文摘要

1.レポーター遺伝子HiBiTを利用したリコンビナントD型肝炎ウイルス（以下HDV）の作成と抗ウイルス薬スクリーニング：前年度まで作成したHiBiTを挿入したリコンビナントD型肝炎ウイルスは、肝がん細胞株内で複製するものの、複製は一過性で、長期間の持続複製が困難だった。さらに、感染性粒子の形成に必須なB型肝炎ウイルス（以下HBV）のエンベロープ蛋白質の存在下でもリコンビナントHDV感染性粒子は産生されなかった。これらの問題点を改善するために、これまでは1倍長のHiBiT-HDV遺伝子やアンチゲノム鎖を利用してリコンビナントHDVを作成していた。今年度は、3倍長のHiBiT-HDV遺伝子を作成し、その複製能を解析したが、1倍長とほぼ同等であり、リコンビナントHDVの作成には至らなかった。2.モンゴルにおけるヒト肝がん組織由来RNAのRNAseq解析：これまでのモンゴルとの共同研究から、HDVとHBVが共感染者の肝がん組織由来RNA、HBV単独感染者の肝がん組織由来RNAを計約50例分、すでに金沢大学へ送付を受けている。まず9例分のRNAに関してRNAseq解析を行い、HDVとHBV共感染者の肝がん組織特異的な計9個の融合遺伝子候補を抽出し、そのうち2個に関して、PCR法で実際に存在を確認できた。また追加で20例分のRNAに関してRNAseq解析を行った。3.モンゴルにおけるヒト肝がん組織と血液の採取：モンゴルの共同研究者（モンゴル国立医科大学のDuger教授）は、モンゴルにおいて肝がんに対して手術療法を受けた患者の肝組織の残余検体からRNAを抽出し、保存している。また肝がんの手術療法をうけた患者の血液を保存すると共に、肝画像所見、腫瘍マーカーを含む血液生化学データや臨床情報の収集、予後の追跡を行っている。