バイオプローブによる細胞核内動的秩序構造の基本原理探索

利用生物探针探索细胞核动态有序结构的基本原理

• 批准号: 21H01051
• 负责人: 藤井 修治
• 金额: $ 10.57万
• 依托单位: Toyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H01051/
• 关键词: 細胞核; バイオプローブ; 秩序構造; 共焦点レオロジー; 動的秩序構造; 染色体; 粘弾性

目的はバイオプローブを用いて細胞核内部のダイナミクスを調べることである。特に、静止場と応力場におけるバイオプローブのダイナミクスを基に、変形が与える核内ダイナミクスへの寄与を明らかにする。バイオプローブ(FtH)を細胞核内に発現した細胞(HeLa)にプローブの自己会合体形成を促進させる酸化剤(2,3’-Dipyridyldisulfide)を加えてタンパク質自己会合体形成を促進させ、形成された自己会合体の拡散挙動を解析した。自己会合体は100nm程度の大きさである。平均自乗変位の時間依存性より、そのべき乗則の指数が3つの時間領域に分類できることを確認した。また当初の計画にはなかったが、細胞核内部で光誘起型の液-液相分離を示すRNA結合タンパク質(FUS)の拡散ダイナミクス解析を実施した。水銀ランプを光源とする蛍光顕微鏡上でフィルターを介して青色光を細胞に照射し、液液相分離によりFUSの球状ドメインが形成されたところで、球状ドメインの拡散挙動を解析した。球状ドメインは数マイクロメートルまで成長し、時間経過とともにオストワルドライプニングによりさらに合体・成長する。そのため限られた時間帯ではあるが、sub-diffusionを示すことを確認した。ただしドメインサイズが大きいためか、平均自乗変位のべき乗則の指数のクロスオーバーは見られなかった。核内ダイナミクスを検出するためのバイオプローブとしては前者の方が適切である。

The purpose of this study is to investigate the effects of nuclear modification on the immune system. Special, static field and magnetic field are the basic, shape-dependent and nuclear factors. In addition, the acid (2,3'-Dipyridyldisulphide) was added to promote the formation of self-assembly in the nucleus of HeLa cells. I will combine the 100nm level of large. The time dependence of the average self-adjustment position is determined by the index of 3 times and the classification of the time domain. In the initial project, light-induced liquid-liquid separation of RNA binding protein (FUS) and dispersion analysis of RNA in the nucleus were carried out. Mercury light source, light microscope, cyan light, cell irradiation, liquid-liquid separation, FUS spherical particles formation, spherical particles dispersion, analysis The number of spherical particles is increased, and the time period is increased. The time limit is zero. The index of the index of the index In the nuclear field, it is necessary to select the appropriate solution.

项目成果

微小プローブ粒子を用いた細胞核内ダイナミクス

使用小探针颗粒的细胞核动力学

• 发表时间: 2023
• 作者: Ohki Daigo;Yoshimi Kazuyoshi;Kobayashi Akito;Misawa Takahiro;松本正和;藤井修治
• 通讯作者: 藤井修治