細胞壁成分分布の網羅的解析から迫る樹木の姿勢制御機構

综合分析细胞壁成分分布揭示树姿控制机制

基本信息

批准号：
21H02257
负责人：
吉永新
金额：
$ 8.57万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

あて材形成の比較対象となる針葉樹のヒノキおよび、シリンギルリグニンの割合が高い広葉樹のシラカシの正常材について、リグニン中の結合様式に特異的に反応する4種類のモノクローナル抗体を用いて免疫蛍光標識した。得られた画像を解析して、細胞壁各部位での標識強度を比較する方法を確立した。連続切片の自家蛍光像からリグニン全体の分布も評価し、細胞壁の木化過程と結合様式の変化について考察した。その結果、ヒノキ仮道管二次壁では、8-8'型、8-O-4'型、5-5'型構造は未木化の段階で存在し、木化が進むと8-5'型構造も形成されること、コーナー部の複合細胞間層では未木化の段階で8-8’型構造が存在し、木化が進むと8-5型、8-O-4'型構造も形成されることが明らかになった。一方、シラカシの道管要素と周囲仮道管の二次壁では、5-5'型構造が木化初期に形成され、木化の進行に伴って8-O-4'型構造の割合が増加すること、木部繊維の二次壁では未木化段階で8-O-4'型、5-5‘型構造が二次壁外側に存在し、木化が進むと、8-O-4'型、5-5’型構造が内側に形成され、木化完了段階では二次壁全体で均一に形成されることが明らかになった。ポプラの引張あて材より、滑走式ミクロトームを用いて横断切片を作製し、超音波処理によりG層を集める方法を検討し、ごく微量に道管要素の断片も混入するものの、純度よくG層を単離する方法を確立し、約200mgのG層を得た。単離されたG層を蛍光顕微鏡で観察したところ、ごく弱い自家蛍光がG層全体に観察された。H型5-5’型構造を含む2量体モデル化合物を合成した。このモデル化合物はR4年度に新しいモノクローナル抗体作製のための抗原として使用する予定である。

针叶树的正常材料是用于比较靶材料的靶标，而宽叶裂解的橡木（具有较高比例的丁丁蛋白）的宽叶裂解橡木的正常材料被使用四种类型的单克隆抗体进行免疫荧光标记。分析获得的图像以建立一种比较每个细胞壁上标记强度的方法。还从串行切片的自荧光图像中评估了整个木质素的分布，并讨论了细胞壁木材木材过程和结合模式的变化。 As a result, it was revealed that in the secondary wall of the cypress duct, 8-8' type, 8-O-4' type, and 5-5' type structures exist at the unwooden stage, and when timbering progresses, 8-5' type structures are formed, and in the complex intercellular layer at the corner, 8-8' type structures exist at the unwooden stage, and when timbering progresses, 8-5 and 8-O-4' type也形成了结构。另一方面，在白橡木的管道元件和周围的临时管道的次要壁中，在木材的早期阶段形成了5-5'型结构，而8-O-4'Type结构的比例随着木材的进度而增加。在木材纤维的次要墙中，在未木阶段的次要墙壁外部存在8-O-4'-type和5-5'-type结构，并且随着木材的进展，在内部和完整的偶数上均不完整，随着木材的进行8-o-o-4'-type和5-5'-type结构的形成。研究了一种方法，可以使用滑动的微型组从杨树拉伸材料制备横截面，并通过超声处理收集G层。尽管混合了极少量的管道元件片段，但建立了一种方法以较高的纯度分离G层，从而导致大约200 mg的G层。当在荧光显微镜下观察到分离的G层时，在整个G层中观察到非常弱的自动荧光。合成了包含H型5-5'结构的二聚体模型化合物。该模型化合物计划用作2014财年生产新单克隆抗体的抗原。