がん発症・進展過程におけるYAPの活性化の機械的制御機構の解明

阐明癌症发病和进展过程中 YAP 激活的机械控制机制

• 批准号: 21H03003
• 负责人: 田尾 嘉誉
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03003/
• 关键词: がん発症・進展; YAP活性化; メカノホメオスターシス; CODEX法; magnetic tweezers法; YAPレポーターマウス; YAP; メカノホメ オスターシス; イメージング・マスサイトメトリー; がんオルガノイド

本解析で用いるヒト標本採取については、山口大学大学院・医学部医学系研究科・消化器・腫瘍外科学講座から提供を受け、現在までに30検体の大腸癌標本(がん部、非がん部を含む)がすでに得られている。また、多重染色法である Akoya Science社のCODEX法について予備検討を行なった。試料としては、マウス慢性炎症系モデルマウスを用いて各バーコード標識抗体の最適化条件検討を行なった。デキストラン硫酸ナトリウム(DSS)投与によりマウス大腸に慢性炎症を引き起こし、発癌させるモデル系がすでに確立している。蛍光抗体染色法により、炎症領域においてYAP陽性細胞の増加が観察され、YAP活性化細胞であるといえる。次に、このマウス炎症・発癌系を用いて CODEX法で使用する免疫細胞マーカーである 各種抗体の条件検討を行なった。結果、14種類の抗体の検出に成功し、マウス大腸炎症領域を含む切片上で各抗体の数値化・定量化することにも成功した。また、CODEX法による位置情報を保持した状況で多次元データ解析を遂行できる基盤を構築した。

This analysis was conducted by the Department of Gastroenterology, Faculty of Medicine, Yamaguchi University Graduate School of Medicine. The CODEX method of Akoya Science was used to prepare the sample. Study on optimization conditions of antibody for each drug marker The treatment of chronic inflammation of the large intestine, the development of cancer, and the establishment of the disease system The increase of YAP positive cells in the inflammatory field was observed by light antibody staining. The CODEX method was used to investigate the conditions of various antibodies in immune cells. Results: 14 kinds of antibodies were successfully detected and quantified on sections containing large intestine inflammation. The CODEX method maintains the position information and performs multiple element analysis to construct the base disk.