Prevention of progressive intimal hyperplasia (IH) of vein graft in pig model by suppression of IH related genes detected in clinical specimens.

通过抑制临床标本中检测到的 IH 相关基因来预防猪模型静脉移植物进行性内膜增生 (IH)。

• 批准号: 21H03013
• 负责人: 東 信良
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Asahikawa Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03013/
• 关键词: 内膜肥厚; グラフト狭窄; 閉塞性動脈硬化症; 静脈グラフト; 下肢末梢動脈バイパス; 冠動脈バイパス

１．ブタ内頸静脈への拡散医薬導入方法の確立口径や壁厚がヒト大伏在静脈に近いブタ（30~50Kg）の内頸静脈を摘出し、これまでの研究でも用いてきたCRE decoy (5′-TGACGTCATGACGTCA TGACGTCA-3′)にbiotin標識したものを、摘出した静脈に導入する方法を検討した。遺伝子導入方法として、圧入法(血管内腔と外腔に同じ圧をかける）を用い、至適濃度や圧など、至適導入条件を探索した。まず、圧入法に必要なプラスチック器具を試作し、組織切片を作成して導入効率の検証を行った。結果として、2気圧、10分間での圧入法によって、中膜表層までの核酸医薬導入が確認された。２．炎症惹起静脈移植モデルの確立臨床において感染創を有する下肢から採取した静脈グラフトが採取時すでに内膜肥厚が形成されていることにヒントを得て、バイパスグラフトとして移植する静脈の一部に炎症を惹起させて修飾を施した静脈グラフトモデルを確立するため、まず、ラットにてモデル確立を試みた。炎症惹起静脈移植モデルの作成方法として、バイパスで使用予定の大腿静脈を一部露出し、10mm長の範囲を全周性に剥離した後、リポポリサッカライド（LPS）溶液を含んだ酸化セルロース綿で剥離部分を被覆する方法を用いて、1~2週間後にその静脈を摘出して病理組織学的検討を行った。しかし、細胞浸潤や明らかな内膜肥厚は起こらなかった。一方、大腿静脈内腔にLPS溶液を注入することで、細胞浸潤を伴い内膜肥厚が発生することが明らかとなってきた。静脈に内膜肥厚を確実に起こさせる条件設定を実施中の段階である。

1. To establish the method of introducing biotin into jugular vein, CRE decoy (5′-TGACGCATGACGTCA-3′) was used to extract biotin from jugular vein. The method of introduction of ion into blood vessel was studied. The optimum concentration and pressure were investigated. The necessary instruments for the preparation of tissue sections and the identification of the introduction rate were tested. Results The nucleic acid was introduced into the membrane by pressure injection method at 2 ℃ and 10 minutes. 2. Inflammation causes vein graft to establish clinical infection, lower limb infection, vein graft to establish intimal hypertrophy, vein graft to establish inflammation, vein graft to establish inflammation. The method of preparing the vein graft tissue caused by inflammation was carried out by using a predetermined thigh vein to expose a part of the vein, a 10mm long vein, and a whole circumference of the vein. After the vein was peeled off, a solution of LPS was used to cover the peeled part of the vein. The vein was extracted after 1 to 2 weeks. The pathological study was carried out. Cell infiltration and thickening of the intima. LPS solution was injected into the lumen of the thigh vein, and cell infiltration accompanied by intimal hypertrophy occurred. The condition of venous intimal hypertrophy is set up according to the stage of implementation.