Prevention of progressive intimal hyperplasia (IH) of vein graft in pig model by suppression of IH related genes detected in clinical specimens.

１．ブタ内頸静脈への拡散医薬導入方法の確立口径や壁厚がヒト大伏在静脈に近いブタ（30~50Kg）の内頸静脈を摘出し、これまでの研究でも用いてきたCRE decoy (5′-TGACGTCATGACGTCA TGACGTCA-3′)にbiotin標識したものを、摘出した静脈に導入する方法を検討した。遺伝子導入方法として、圧入法(血管内腔と外腔に同じ圧をかける）を用い、至適濃度や圧など、至適導入条件を探索した。まず、圧入法に必要なプラスチック器具を試作し、組織切片を作成して導入効率の検証を行った。結果として、2気圧、10分間での圧入法によって、中膜表層までの核酸医薬導入が確認された。２．炎症惹起静脈移植モデルの確立臨床において感染創を有する下肢から採取した静脈グラフトが採取時すでに内膜肥厚が形成されていることにヒントを得て、バイパスグラフトとして移植する静脈の一部に炎症を惹起させて修飾を施した静脈グラフトモデルを確立するため、まず、ラットにてモデル確立を試みた。炎症惹起静脈移植モデルの作成方法として、バイパスで使用予定の大腿静脈を一部露出し、10mm長の範囲を全周性に剥離した後、リポポリサッカライド（LPS）溶液を含んだ酸化セルロース綿で剥離部分を被覆する方法を用いて、1~2週間後にその静脈を摘出して病理組織学的検討を行った。しかし、細胞浸潤や明らかな内膜肥厚は起こらなかった。一方、大腿静脈内腔にLPS溶液を注入することで、細胞浸潤を伴い内膜肥厚が発生することが明らかとなってきた。静脈に内膜肥厚を確実に起こさせる条件設定を実施中の段階である。

１．ブタ内頸静脈への拡散医薬導入方法の確立口径や壁厚がヒト大伏在静脈に近いブタ（30~50Kg）の内頸静脈を摘出し、これまでの研究でも用いてきたCRE decoy (5′-TGACGTCATGACGTCA TGACGTCA-3′)にbiotin標識したものを、摘出した静脈に導入する方法を検討した。遺伝子導入方法として、圧入法(血管内腔と外腔に同じ圧をかける）を用い、至適濃度や圧など、至適導入条件を探索した。まず、圧入法に必要なプラスチック器具を試作し、組織切片を作成して導入効率の検証を行った。結果として、2気圧、10分間での圧入法によって、中膜表層までの核酸医薬導入が確認された。２．炎症惹起静脈移植モデルの確立臨床において感染創を有する下肢から採取した静脈グラフトが採取時すでに内膜肥厚が形成されていることにヒントを得て、バイパスグラフトとして移植する静脈の一部に炎症を惹起させて修飾を施した静脈グラフトモデルを確立するため、まず、ラットにてモデル確立を試みた。炎症惹起静脈移植モデルの作成方法として、バイパスで使用予定の大腿静脈を一部露出し、10mm長の範囲を全周性に剥離した後、リポポリサッカライド（LPS）溶液を含んだ酸化セルロース綿で剥離部分を被覆する方法を用いて、1~2週間後にその静脈を摘出して病理組織学的検討を行った。しかし、細胞浸潤や明らかな内膜肥厚は起こらなかった。一方、大腿静脈内腔にLPS溶液を注入することで、細胞浸潤を伴い内膜肥厚が発生することが明らかとなってきた。静脈に内膜肥厚を確実に起こさせる条件設定を実施中の段階である。