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骨細胞の機能別サブポピュレーションの特定

骨细胞功能亚群的鉴定

基本信息

批准号：
21H03051
负责人：
林幹人
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H03051/
关键词：
骨細胞

项目摘要

近年、骨細胞は骨の恒常性に必須の役割を果たすだけでなく、全身の個体機能維持に関わる多種多様な役割を有することが明らかにされてきた。しかしながら、これまで骨細胞は単一の集団とみなされ、機能的な細分化が行われてこなかったのが現状である。本研究では、我々が新たに作製した骨細胞特異的にCreを発現するマウスを用いることで純度の高い骨細胞の分取が可能となったことから、この方法によって野生型や様々な病態モデルのマウスから得られる細胞を用いたシングルセル解析を行う。これにより、骨細胞サブポピュレーションの特定と更なる新機能の推定、機能的分化に関わる新規因子の同定を可能とし、それらの細胞・成体レベルでの解析から、骨細胞の真の全貌解明を目標とする。本年度までに、Ai9レポーターマウスと新規骨細胞特異的Cre発現マウスを交配することで、骨細胞のみを特異的にtdTomatoで標識し単離する方法を確立した。さらに、Chromiumを用いたバーコーディングとライブラリ調整を行い、シーケンス結果を詳細に解析し、複数の骨細胞サブポピュレーションを特定することに成功した。これまでに集積したデータベースとの比較を行い、特定された各クラスターが骨細胞であることを確認した。また、若齢と老齢の比較を行い、各クラスターや遺伝子発現の変化を解析した。他の解析も含め、骨細胞の新たな機能に関わっていると考えられる遺伝子を絞り込み、骨細胞特異的コンディショナル欠損マウスの作製を行っている。

In recent years, bone cells have to work hard to maintain the function of the whole body. Bone cells are divided into groups and functions. In this study, we developed a new method for the identification of osteocyte-specific Cre and its use in the isolation of high-purity osteocytes. Therefore, it is possible to deduce new functions specific to and update the bone cell support system, identify new regulatory factors related to functional differentiation, analyze the existing cell and adult cells, and clarify the true picture of bone cells. This year, the new bone cell-specific Cre identification method was established. In addition, Chromium can be used to analyze the results in detail, and the results can be used to analyze the characteristics of bone cells. This is the first time I've ever seen a bone cell in my life. The analysis of the differences between the two types of information The analysis of bone cells is related to the function of bone cells.