東南アジア大陸部に分布する健康増進効果の高い伝統的香草・果実の原種系統の探索研究

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2021年度はミントに焦点をあて，フィールド調査に必要な検定試薬の開発（１）と遺伝学的調査（１）をおこなった．１．カルボンを含有するC型ミントとピペリテノンオキシドを含有するPO型ミントの迅速検定法の開発：フィールド調査のときにミントの採取時に迅速にPO型ミントの同定ができれば，調査を飛躍的に進めることができる．ミントの型の判定は，GC-MSかHPLCにたよる機器分析しか方法がないため，現地でミントを採取してから試料化して日本に移送する手段をとるため1回の調査の検体数に限りがあることが調査の律速となっている．これを解決するために，現地で使えるPO判定試薬の開発を試みた．Janovsky反応を利用した呈色法を試み，ミントのヘキサン抽出液と試薬に3,5-ジニトロ安息香酸溶液／メタノール溶液と水酸化ナトリウムを用いて予備検討したところ，紫色の呈色を指標に判別できる可能性が示唆されたため，今後条件を検討して，現地で安全に検出ができる改良法の開発へと進める．具体的には，ヘキサンとメタノールの代替に70%エタノール，水酸化ナトリウムの代替に重曹や石灰をあてることができれば現地で安全に検出ができる改良法が開発できるかもしれない．２．ミントの系統特異性を決定する遺伝学的調査：ミントは種間交雑や倍数化により多種であるため，フィールド調査で収集したミントの分類に資するSSRマーカーによる分類と葉形態による分類を試みた．ミントには葉脈パターン（網状脈と平行脈）と葉の形状（LSI：縦横比）を数値化することで明確に区別できる種があることがわかった．また開発した12パターンのSSRマーカーによりミントの系統をグループI－VIに分類することに成功し，東南アジアのミントはグループ I と II に分類された．これによりまだ分類されていない東南アジアのミントの遺伝的背景の解明につながる結果を得ることができた．