Innate immune response via lysosomal localized Akt binding molecule

通过溶酶体定位的 Akt 结合分子进行先天免疫反应

• 批准号: 19K16598
• 负责人: 平田 徳幸
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K16598/
• 关键词: オートファジー; Akt; マクロファージ; 樹状細胞; インフルエンザウイルス; 新型コロナウイルス; 核酸医薬; リソソーム; VRK2; 自然免疫応答

作成したマクロファージ細胞株と樹状細胞株の発現を確認後、初年度に計画した病原体由来の活性化物質を認識する受容体リガンドによる刺激、リソソーム活性の測定、細胞内シグナル伝達の解析、細胞内外のサイトカイン産生について、早急に実験を推し進める予定であったが、発現確認の際のマウスVrk2を認識出来る抗体の作成の検討までのみが完了している状態である。しかしながら、教室に所属した留学生がPtdIns(3)P結合性の核酸医薬(RNA aptamer)に関する論文発表を行い、そのRNA aptamerを遺伝子導入した肺癌細胞株A549の安定発現細胞株を作成した。そしてその細胞株がインフルエンザウイルスの感染を抑制することをプラークアッセイ、細胞内シグナル伝達、細胞内の分子局在性にて証明することができた(未発表)。そして、現在世界中で新型コロナウイルスCOVID-19(SARS-CoV-2)の感染が流行していることから、この受容体(ACE2とTMPRSS2)を共発現させた後RNA aptamerを安定発現した細胞株(HEK293T)に、偽型ウイルス(Pseudotype SARS-CoV-2)を用いて、この新型コロナウイルスに対する感染抑制の可能性を考えて実験を進めていたが、私の任期が満了したことから、実験は間に合わなかった。今後、この件についてご相談させていただいている教授と相談し、得られたデータ内での論文報告を検討する。

Made し た マ ク ロ フ ァ ー ジ cell lines と dendritic cell lines の 発 を confirmed now, at the beginning of the annual に plan し た pathogens origin の activeness material を understanding す る by let body リ ガ ン ド に よ る stimulation, リ ソ ソ ー の ム activity determination, intracellular シ グ ナ ル 伝 の parsing, the cells inside and outside の サ イ ト カ イ ン produce に つ い て, early urgent に be 験 を push し into め る to decide で あ っ た が, 発 の confirm international の マ ウ ス Vrk2 を know out る antibody の made の beg ま 検 で の み が finished し て い る state で あ る. し か し な が ら, classroom に belongs し た students が PtdIns (3) P associativity の medical 薬 nucleic acid (RNA aptamer) に masato す る paper 発 table を い, そ の RNA aptamer を posthumous son 伝 import し た lung cancer cell line A549 の settle 発 cell lines を now done し た. そ し て そ の cell lines が イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス の を inhibiting infection す る こ と を プ ラ ー ク ア ッ セ イ, intracellular シ グ ナ ル 伝, bureau of の molecules in a cell in the sexual に て prove す る こ と が で き た (not 発 table). そ し て, now world で new コ ロ ナ ウ イ ル ス COVID - 19 (SARS - CoV - 2) の infection が popular し て い る こ と か ら, こ の by let body (ACE2 と TMPRSS2) を 発 now total さ せ た after RNA aptamerを stably developed a た cell line (HEK293T)に, Pseudotype ウ ス ス(Pseudotype) SARS - CoV - 2) を い て, こ の new コ ロ ナ ウ イ ル ス に す seaborne る infection inhibition の possibility を exam え て be 験 を into め て い た が, private の term が against the し た こ と か ら, be 験 は に between us わ な か っ た. In the future, こ の a に つ い て ご spoke さ せ て い た だ い て い る professor と spoke し, ら れ た デ ー タ within で の paper を beg す 検 る.

项目成果

National Insititutional Health (NIDCR)(米国)

国家卫生机构 (NIDCR)（美国）

Identification of RNA aptamer which specifically interacts with PtdIns(3)P

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2019.07.034
• 发表时间: 2019-09-10
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Donia, Thoria;Jyoti, Bala;Noguchi, Masayuki
• 通讯作者: Noguchi, Masayuki

Rescue of Adeno-Associated Virus Production by shRNA Cotransfection

• DOI: 10.1089/hum.2019.249
• 发表时间: 2020-04-28
• 期刊: HUMAN GENE THERAPY
• 影响因子: 4.2
• 作者: Guimaro, Maria C.;Afione, Sandra A.;Chiorini, John A.
• 通讯作者: Chiorini, John A.