プロテオミクス解析手法を用いたビワアレルゲンの網羅的解析

利用蛋白质组学分析方法综合分析枇杷过敏原

• 批准号: 19K17787
• 负责人: 三津山 信治
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2023-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K17787/
• 关键词: ビワアレルギー; ビワアレルゲン; 蛋白質精製; 2次元電気泳動; 蛋白質同定; アレルギーコンポーネント; プロテオミクス解析; 花粉-食物アレルギー症候群

これまでにビワ蛋白質の抽出、精製条件を詳細に検討した報告がないため、ビワ蛋白質の最適な抽出、精製条件を検討し、ビワアレルゲン蛋白質解析のためのビワ蛋白質の抽出、精製を進めている。精製した蛋白質溶液を用いて、SDS－PAGEによる分離確認と1次元ウェスタンブロッティングを行い、シグナル検出を検討している。1次抗体としてヒト血清を使用し、2次抗体として抗ヒトIgE、IgA+IgG+IgMの2種類を使用し、1次元ウェスタンブロッティングを施行している。また、2次元電気泳動も、ウェスタンブロッティングを用いて施行している。使用する抗体は、1次抗体としてヒト血清を使用し、2次抗体としては、1次元ウェスタンブロッティングで反応のあった抗ヒトIgE、IgA+IgG+IgMの抗体を使用している。ウェスタンブロッティングを用いた2次元電気泳動について、ビワアレルギーの患者血清を作用させ、マッチングした抗原スポットの切り抜き、抗原スポットの蛋白質解析を試みている。トリプシン消化ペプチド単位で解析を行っているが、現在、ビワの蛋白質のデータベースがないため、LC-MS/MSによるタンパク質同定が困難となっており、ビワ属を含むバラ科のアミノ酸配列データベースを参照し、同定する方法を検討している。完全一致する配列情報が存在すれば、同定できる可能性はあるが、もし、完全一致する配列情報が存在しなければ、マススペクトルから配列を読み取るデノボ配列分析を行い、読み取った配列のBLAST検索を行い、相同性のあるタンパク質を検索することを検討している。

Protein extraction, protein extraction and protein extraction. The essence of the protein solution is to confirm that the first-dimensional protein solution is separated from each other with the help of SDS-PAGE and so on. One antibody test was used in serum, two antibody tests were used in anti-IgE, IgA+IgG+IgM and other drugs were used, and one antibody was used in the first time. The two-dimensional swimming exercise, the swimming exercise and the swimming exercise. Use "antibody", "antibody", "serum", "antibody", "anti-antibody", "anti-IgE", "IgA+IgG+IgM" antibody. The serum of the patients was detected by two-dimensional swimming, the serum of the patients, the antigen, the protein, the protein, the antigen, the protein, the serum, the serum, the antigen, the protein, the serum, the serum, the antigen, the This is the first time to analyze the data in this paper. In this paper, we have to analyze the data in this paper. In this paper, we have to analyze the data in this paper, we will find that there is no difference between the two parts of the world. In this paper, we use the following data to analyze the data in this paper. In this paper, we use the same method to determine the contents of the protein, protein There is a problem in the configuration of the same column, the possibility of the same configuration, the existence of the configuration, the configuration of the queue, the alignment of the row, the row of the BLAST, the line of the same line, the line of the line.