Multifaceted pathophysiologic evaluation of sepsis targeting the intestinal microflora and development of novel therapeutic strategies

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ICUに入室した敗血症患者を対象として，臨床情報（敗血症の原因疾患、既往疾患，重症度スコア、使用薬剤，血液マーカー，治療介入や生存期間など）、糞便や血液検体の採取を行い、解析/保管した。1)血清検体を用いてELISA法で腸管透過性のマーカーの一つである血清zonulin値を測定した。血液培養陽性患者や，死亡患者では，血清zounlin値が低かった。zonulinを分泌する腸管細胞の高度な障害を反映し予後悪化に関連する可能性があり、今後，サンプル数を増やすとともに，血清I-FABPなどの腸管障害のマーカーとの相関を調査する。2)便検体を用いた16S菌巣解析を完了した。敗血症患者の腸内細菌叢では、Escherichia spp.、Shigella spp.、Enterococcus spp.等特有の菌種の増加を確認した。大腸菌のシングルクローン3献体から、Shiga toxinを検出した。抗菌薬投与とトキシン産生の関連について検討を加えている。3)スワブ付着便から調整した便懸濁液の移植により無菌マウスに細菌叢の定着は見られることを確認した。今後、目的の菌もしくは目的の菌を含む糞便を移植し、マウス敗血症モデルでの表現型を確認する。4)CLP（cecal ligation and puncture）による敗血症マウスモデルで、精神・認知障害、行動の長期的障害におけるTSPOの役割を調べた。TSPO遺伝子欠損マウスでは，WTマウスに比べて，死亡率が高く，体重減少が遷延した。また，敗血症回復後の不安様行動，うつ様行動，前肢筋力低下が増悪した。海馬のRNA-seq解析により，C1q補体経路の遺伝子（C1qb，C1qc，Tyrobp）の発現上昇が，不安様行動，うつ様行動や，握力試験での筋力低下と関連した。TSPO knock out＋CLP群はWT＋CLP群に比べて，敗血症導入後4時間後の血清プロゲステロン値が有意に低値であった。今後，TSPOと敗血症侵襲によるステロイド合成との関連を調べる。