１細胞リボソームプロファイリング法の開発と動物組織への応用

单细胞核糖体分析方法的开发及其在动物组织中的应用

• 批准号: 20J10665
• 负责人: 木村 悠介
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-24 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J10665/
• 关键词: 重力を介したミトコンドリア翻訳制御の発見; 細胞接着を介したミトコンドリア翻訳制御の発見; 細胞内ミトコンドリア翻訳活性の解析手法の開発

シングルセルリボソームプロファイリングの確立に向けて、多様な条件検討を行ってきた。その過程で、細胞が微小重力にさらされるとミトコンドリア内の翻訳が低下するという新たな生命現象を発見するに至った。これは当初の計画から全く予想出来なかった新たな知見である。その後、このメカニズムを更に詳細に粘り強く解析したところ、そのメカニズムの一端が明らかになってきた。微小重力に細胞がさらされると、細胞接着が減弱することが知られている。本研究では、1) 細胞接着の増減と相関してミトコンドリア翻訳が制御されていること、2)細胞接着の情報がFAKと呼ばれるリン酸化酵素を発端にミトコンドリアに伝わっていること、3) 微小重力においても細胞接着の減少が原因となってミトコンドリア翻訳の減少につながっていること、などこれまでの生物学研究で見過ごされていた生命現象を捉えることに成功した。さらに、ミトコンドリア翻訳をよりハイスループットに解析するための技術として mitochondrial fluorescent non-canonical amino-acid tagging, fluorescence-activated cell sorting （mito-FANCAT-FACS）法を開発した。これは HPG と呼ばれる メチオニン誘導体を用いて、ミトコンドリア内で新規に合成されたタン パク質のみを標識し、その後 FACS で解析する、という手法である。この手法によって、細胞間のミトコンドリア翻訳の不均一性を解析することを可能にした。

The system is based on the following parameters: In the process, the cell is exposed to microgravity, and the cell is exposed to new life phenomena. The original plan was to come up with a new idea. After the game, the game will be more detailed. The game will be more detailed. The microgravity of the cell decreases, and the cell decreases. This study includes: 1) the correlation between cell adhesion and decrease; 2) the information of cell adhesion and FAK; 3) the cause of cell adhesion decrease in microgravity; 4) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 5) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 6) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 7) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 8) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 9) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 9) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 10) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 11) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 12) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 13) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity; 14) the correlation between cell adhesion and decrease in microgravity. Biological research has been successful in capturing life phenomena. The mitochromatic fluorescent non-canonical amino-acid tagging, fluorescence-activated cell sorting (mito-FANCAT-FACS) method was developed. The HPG and FACS analysis methods are used in the synthesis of HPG and FACS. The method of analysis of the heterogeneity of the cellular structure is possible.