脳梗塞急性期治療において移植可能な自家歯髄・歯肉由来神経系細胞の研究開発

可移植用于脑梗塞急性治疗的自体牙髓和牙龈源性神经系统细胞的研发

• 批准号: 20J12956
• 负责人: 松村 英明
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-24 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J12956/
• 关键词: 脳梗塞; 再生医療; 神経再生; 歯髄

歯髄組織から神経系細胞を分化誘導して脳梗塞周囲に移植する再生医療の研究をおこなった。成熟した神経系細胞は神経突起の本数が多く、長く、移植後に酸素や血流が豊富に必要となる。一方で突起の本数が少なく、短い、未成熟な神経系細胞は、成熟しているものに比べて酸素需要が低く、虚血環境への移植に適していると考えた。しかし、未成熟神経系細胞は、通常の培養条件下では速やかに成熟してしまうため、安定的に移植に必要十分な細胞数を確保することが困難であった。その為、本研究では、未成熟な神経細胞に発現しているEカドヘリンを抗体のFab部分に組み込んだカドヘリンキメラ抗体を用いる事で、細胞の成熟度の調整をはかった。歯髄組織からの細胞培養の各段階で、Eカドヘリンキメラ抗体でコートした培養皿を用いた。種々の条件を検討したが、結果として、当研究室で従来行われていた培養方法の最終段階でEカドヘリンキメラ抗体でコートした培養皿を用いる事で、成熟度を抑えた細胞を得ることができた。フローサイトメトリーを用い、Eカドヘリンキメラ抗体でコートした培養皿使用の有無による、細胞プロファイルの違いも合わせて評価した。得られた細胞は突起の本数が短く、少なく、また、培養上清のELISAの結果、血管新生因子VEGF(Vascular Endothelial Growth Factor)の分泌が高かった。その為、脳梗塞巣周囲という、移植細胞の生着に非寛容的な低酸素・高酸化ストレス環境に耐え、より生着に適した細胞が得られた。今回得られた細胞を脳梗塞に対する再生医療に用いる事で、移植後早期にホストからの栄養・酸素供給が得られ、その結果、神経細胞への分化、生着による神経血管ユニットの再生を得て、後遺症の軽減を図れる可能性があると考え、今後、脳梗塞モデルマウスへの移植実験をおこなって検証する必要がある。

The study of regeneration medicine in infarct peripheral transplantation The number of neuroprocesses in mature neurocytes is increased, and the number of neuroprocesses in mature neurocytes is increased. After transplantation, the number of neuroprocesses is increased. The number of protrusions in one side is small, short, immature, and the requirements for mature neurons are low compared to those for transplantation in a blood-deficient environment. It is difficult to ensure the necessary number of immature cells for transplantation under normal culture conditions. In this study, the development of immature neurons was studied. The Fab part of the antibody was assembled. The regulation of cell maturity was studied. Each stage of cell culture in the tissue culture was used for the detection of antibodies. The conditions for seed production are discussed, the results are discussed, and the final stage of the culture method is carried out in the laboratory. The use of cell culture media, the presence of cell culture media and the presence of cell culture media are evaluated. The results of ELISA in culture supernatant and the secretion of VEGF(Vascular Endothelial Growth Factor) were high. For example, if the transplanted cells are not cultured in a low-and high-acid environment, they will be cultured in a suitable environment. The results of this study include: the use of regenerative medicine in the treatment of infarction, the availability of nutrients and acid in the early post-transplant period, the differentiation of neurocytes, the regeneration of neurovascular tissue in the development period, the possibility of reduction of sequelae, and the necessity of transplantation in the future.

项目成果

神経系細胞含有製剤の製造方法

含有神经系统细胞的制剂的制造方法

• 发表时间: 2019

ヒト歯髄から分化誘導した神経系細胞をマウス脳虚血モデルに移植する再生医療の基礎実験

将人牙髓诱导分化的神经系统细胞移植到小鼠脑缺血模型中的再生医学基础实验

• 发表时间: 2020
• 作者: 松村英明; 丸島愛樹; 石川 博; 大山晃弘; 豊村順子; 渡邊美穂; 高岡昇平; 武川寛樹; 石川栄一; 松丸祐司
• 通讯作者: 松丸祐司

ヒト歯髄から分化誘導した神経系細胞をマウス脳梗塞モデルに移植する再生医療の基礎実験

将人牙髓诱导分化的神经系统细胞移植到小鼠脑梗塞模型中的再生医学基础实验

• 发表时间: 2020
• 作者: 松村英明;丸島愛樹;石川 博;大山晃弘;豊村順子;渡邊美穂;高岡昇平;武川寛樹;石川栄一;松村 明;松丸祐司
• 通讯作者: 松丸祐司

ヒト歯髄組織から分化誘導した神経系細胞を移植することで脳梗塞モデルマウスの神経症状が改善する

移植人牙髓组织诱导分化的神经细胞改善脑梗死模型小鼠的神经症状

• 发表时间: 2021
• 作者: 松村 英明;丸島愛樹;石川博;大山晃弘;豊村順子;渡邊美穂;高岡昇平;武川寛樹;石川栄一;松村明;松丸祐司
• 通讯作者: 松丸祐司