权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Structural studies of inhibition mechanism of TRPV3 target inhibitors byCryo-EM

Cryo-EM对TRPV3靶点抑制剂抑制机制的结构研究

基本信息

批准号：
20J13609
负责人：
島田寛人
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J13609/
关键词：
温度生物学構造生物学 TRPチャネルクライオ電子顕微鏡

项目摘要

本研究ではTRPV3阻害剤のTRPV3阻害機構モデルを提唱することで、TRPV3をターゲットとした新規阻害剤設計に有用な情報を与えることを最終目標としていた。TRPV3-74aが2021年2月に発表され、構造解析系の条件を検討した。TRPV3-74aを添加した状態で構造解析を行い、2.9Åの分解能のマップが再構成された。しかし、TRPV3-74aとTRPV3の結合が見られなかったことから、TRPV3阻害剤とTRPV3の結合状態を見る構造解析を断念した。その方針の代替として、昨年度よりTRPVファミリーのヴァニロイド選択性を解明することで、TRPV3のリガンド結合に対する構造生物学的知見を得ることを計画し、侵攻している。ヴァニロイド化合物の一種でTRPV1選択的アゴニストであるレジニフェラトキシンはTRPV3を活性化しない。TRPV3のF656I変異体はレジニフェラトキシン応答性を獲得する。構造比較を行った所、野生型のTRPV3に結合する脂質が、TRPV1のレジニフェラトキシン結合状態の構造におけるレジニフェラトキシンの位置にアシル鎖の一部が存在することが判明した。この脂質はF656I変異体においては移動しており、レジニフェラトキシン結合ポケットと被らない位置にある。このことから、TRPV3の周辺に結合する脂質が、TRPV3のリガンド選択性に寄与している可能性を示唆した。TRPV3のF656I変異体に対してレジニフェラトキシンを添加したところ、分解能4.8Åのマップが得られたが、膜貫通ドメインの部分の密度がモデリングに十分ではなかった。そのため、今後はTRPV3のF656I変異体に対してNanodisc再構成を行う際に環状MSPを用いたNanodiscなどを用いて、F656I変異体の性状を変化させることが必要だと考えている。

The purpose of this study is to improve the performance of the TRPV3 prevention system, the TRPV3 prevention mechanism, the TRPV3 prevention mechanism, the new law prevention device, the useful information device and the target device. TRPV3-74a, February 2021, the conditions for the establishment of the analytical system. TRPV3-74a added data status to create analytical data lines, 2.9mm decomposition energy to analyze data and then to analyze it. The combination of, TRPV3-74a, TRPV3, and TRPV3 was used to analyze the status of the system. In place of this, last year's TRPV plan was used to solve the problem, and the TRPV3 was combined with the knowledge of biology to invade it. The compound was selected by TRPV1. The compound was activated by TRPV3. TRPV3