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蛍光偏光顕微鏡ライブイメージングによるビメンチン動態制御機構の解明

使用荧光偏振显微镜实时成像阐明控制波形蛋白动力学的机制

基本信息

批准号：
20J21131
负责人：
中井紀
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-24 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J21131/
关键词：
細胞骨格蛍光偏光顕微鏡ライブイメージング

项目摘要

【A.全反射型蛍光偏光顕微鏡による 1 分子蛍光偏光イメージング】共同研究先の谷研究室に出張し、1分子蛍光偏光イメージングを行った。現在、所属研究室の川岸助教と協力し、取得した画像から超解像画像を出力するプログラムを開発している。【B.スピニングディスク蛍光偏光顕微鏡の開発】ハイパワーの光源を導入した。また、新しく偏光分光光学系を新しくひとつ作成したことで、スピニングディスク蛍光偏光顕微鏡が利用可能になった。【C.核周囲ビメンチンネットワークの形態および動態の解析】ビメンチンのUnit Length Filamentの動態を調べるため、Unit Length Filamentのみを形成する変異体Vimentin Y117Lの利用を試みた。Vimentin Y117L-Halotagを発現させてUnit Length Filamentを観察することができたものの、我々が開発したビメンチン蛍光偏光プローブは、Unit Length Filamentに結合しなかった。【D.核周囲ビメンチンネットワークと微小管との相互作用の解析】また、二色で蛍光偏光イメージングを行うため、赤色蛍光タンパク質ベースの蛍光偏光プローブの開発を試みた。赤色蛍光タンパク質と抗体様分子の連結方法を最適化することで、アクチンおよびビメンチンの赤色蛍光偏光プローブを作成することができた。この成果を論文として発表した(Nakai, 2021, BBRC)。

[A. Total reflection type polarized light microscope] Joint research on the development of the first valley, one molecule polarized light microscope Now, Kawagishi Assistant Professor of the affiliated research office has cooperated with us to obtain images and contribute to the development of super resolution images. [B. The development of polarized light microscope] A new polarizing spectroscopic optical system is being developed to make use of polarizing micromirrors. [C. Nuclear cycle analysis] Dynamic adjustment of Unit Length Filament, formation of Unit Length Filament and utilization of variant Vimentin Y117L Vimentin Y117L-Halotag is developed by Unit Length Filament, which is combined with Unit Length Filament. [D. Analysis of the interaction between nuclear cycle and microtube], two colors of polarized light, red polarized light, and the development of polarized light. Red light quality and antibody molecular link method optimization, such as: The results of this paper are presented in Nakai, 2021, BBRC.

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Development of nanobody-based POLArIS orientation probes enabled multi-color/multi-target orientation imaging in living cells

基于纳米体的 POLArIS 定向探针的开发实现了活细胞中的多色/多目标定向成像

DOI：
10.1016/j.bbrc.2021.05.088
发表时间：
2021
期刊：
BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
影响因子：
3.1
作者：
Nakai Nori;Sato Keisuke;Tani Tomomi;Kawagishi Masahiko;Ka Hiromasa;Saito Kenta;Terada Sumio.
通讯作者：
Terada Sumio.

Expanded repertoire of POLArIS, a versatile fluorescent probe for molecular orientation.

POLArIS 的扩展功能，一种用于分子定向的多功能荧光探针。