グルタミン酸回収機構を調節する神経細胞とアストロサイトのクロストーク
神经元和星形胶质细胞之间调节谷氨酸恢复机制的串扰
基本信息
- 批准号:20K05963
- 负责人:
- 金额:$ 2.75万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2020
- 资助国家:日本
- 起止时间:2020-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
神経細胞は培養開始後4-5日で神経突起の伸長を始めるが、アストロサイトの分岐形成はこれとほぼ同時に開始すること、この段階で既にアストロサイトの分岐同士が互いを避ける性質を持ち、アストロサイト同士が重ならず排他的な領域を形成しながら空間を埋めていく、タイリング現象に繋がっていることを継時観察によって確認した。そして、グルタミン酸トランスポーターのGLASTやGLT1、GABAトランスポーターGAT3などアストロサイトに特異的な輸送タンパク質や、アストロサイトに特異的な中間径繊維GFAPの発現は、神経シナプスマーカーであるグルタミン酸受容体や小胞型グルタミン酸トランスポーターの発現と並行して上昇すること、リン酸化Ezrinは単独培養アストロサイトの突起の先端にあり神経シナプスへのアプローチに関わるとされるが、GFAPの届かないアストロサイトの突起の先端で、MAP2に標識される神経突起の近傍に局在するものが多いことを免疫染色で観察した。これらの結果について、論文にまとめ、査読に対応し、発表した。続いて、アストロサイトの形態的成熟に関わる神経細胞との相互作用因子について、CRISPR-Cas9による遺伝子破壊の手法でスクリーニングをおこなった。アデノ随伴ウイルスを用いてアストロサイトに遺伝子導入し、ウイルス陽性の細胞に特異的にアストロサイトの分岐形成やタイリングに影響がみられるものを選定した。そして、二百余の候補遺伝子から、三十余りの形態制御に関わる可能性の高いものを選定した。
4-5 days after the start of the culture, the elongation of the neuronal processes begins, and the differentiation of the neuronal processes begins. At the same time, the differentiation of the neuronal processes begins, and the differentiation of the neuronal processes begins. The phenomenon of " GLAST, GLT1, GABA, GAT3, GAT3, GAT3 Ezrin was isolated from culture and examined by immunostaining for the tip of the neurite. GFAP was isolated from culture and examined for the tip of the neurite. MAP2 was used to identify the proximal region of the neurite. The results of this investigation are as follows: CRISPR-Cas9 is the key to the maturation of the morphology of neurons. In addition, the gene expression of the gene is introduced into the cell, and the specific gene expression of the gene is formed in the cell. More than 200 candidates are selected, and more than 30 candidates are selected.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Postsynaptic structure formation of human iPS cell-derived neurons takes longer than presynaptic formation during neural differentiation in vitro.
- DOI:10.1186/s13041-021-00851-1
- 发表时间:2021-10-11
- 期刊:
- 影响因子:3.6
- 作者:Togo K;Fukusumi H;Shofuda T;Ohnishi H;Yamazaki H;Hayashi MK;Kawasaki N;Takei N;Nakazawa T;Saito Y;Baba K;Hashimoto H;Sekino Y;Shirao T;Mochizuki H;Kanemura Y
- 通讯作者:Kanemura Y
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- 影响因子:0
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- 资助金额:
$ 2.75万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows