Elucidation of calcium signaling mechanism in thermotaxis of bovine sperm and its application to improvement of conception rate

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本研究は走温性を利用した精子の検査法や雄ウシの繁殖能力評価法を畜産現場に応用するため、2022年度は以下のことを明らかにした。２．（２）走温性発現精子におけるカルシウム作用機構の解明：精子はFPP（TRPV3チャネル（ch）促進）、17R（TRPV3ch阻害)、GSK(TRPV4ch促進)、RN(TRPV4ch阻害)、ZC（プロトンch阻害）、Q（カリウムch阻害）で処理し、38.5℃の温度一定（一定区）、37.5～39.5℃の温度勾配（勾配区）で、高温域と低温域に移動した精子数（移動能）と運動性を解析した。勾配区の対照区、FPP区、GSK区の高温域への移動能は低温域より有意に高かった。勾配区の対照区、FPP区、GSK区のVAP、尾部屈曲率は高温域で有意に高かった。FPP区のVCL、尾部打頻度は高温域で有意に高く、LINは有意に低かった。走温性発現精子の運動性の変化におけるTRPVch、カリウムchの関与が示唆された。３．（ １ ）走温性発現精子の超活性化運動の解析：精子はプロカイン（Pr）、カフェイン－ヘパリン（CH）、イオノフォア（I）で処理し、一定区と勾配区で、非粘性培地と粘性培地における精子の移動能と運動性を解析した。勾配区では全区において高温域への移動能が高く、粘性培地における移動能は非粘性培地より低下したが、Pr区、CH区、I区では対照区と比べ低下率が小さかった。0hと4hの非粘性、粘性培地での精子の特異運動の割合を調べた。インキュベーション0hの粘性培地のPr区は頭部を激振し遊泳（HP）；100%、 CH区はHP；42%、頭部を激振し非移動（NP）；10% を示した。4hの粘性培地のPr区はHP；70%、CH区はNP；47% を示した。粘性培地における精子の走温性の発現が確認され、超活性化運動精子は粘性培地に適応し運動性を変化する可能性が示唆された。