ニワトリfoxl3遺伝子の解析から探る， 鳥類特有の性分化機構

通过分析鸡foxl3基因探索鸟类特异性性别分化机制

• 批准号: 19J22544
• 负责人: 市川 健之助
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-25 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J22544/
• 关键词: 始原生殖細胞; ニワトリ; 性分化; 性決定; foxl3; RNA-seq

令和3年度では主に, (1) RNA-seq解析結果を検証するためのqPCR解析, (2) レチノイン酸を用いた培養PGCへの刺激試験, を前年度末より引き続き行なった. (1) のqPCR解析では, 標的としたメス由来PGCに特徴的な8つの因子が全て, RNA-seq解析と同等の発現パターンを有することを明らかにした. 一方 (2) の刺激試験では, オス由来培養PGCをレチノイン酸で刺激すると, RNA-seq解析で同定したメス由来PGCに特徴的な因子の発現が誘導されることを確認した. これらの成果と前年度から行なっていたRNA-seq解析から, ニワトリのPGCは, 生殖腺への定着後にレチノイン酸を介してメス先駆的な分化を生じること, およびその過程における遺伝子発現プロファイルの変化を明らかにした. 本成果は査読付学術雑誌に投稿中である他, プレプリントとしてすでに一般公開している.加えて, 当初計画で予定していたメス由来培養PGCへのfoxl3の遺伝子改変は, 当該細胞が培養中に頻繁に分化を生じるため, 実現できなかった. そこで, この問題を解決するため, 令和3年度では (3) 培養PGCの未分化性維持機構の解明にも着手した. 本解析では, 分化したPGCを標的とした免疫染色とRNA-seq解析を行なった. その結果, PGCは分化の過程で生殖細胞としての性質を失い, 間葉系細胞様の性質を獲得することを見出した. 本成果は日本家禽学会2022年度春季大会で報告した. 今後はこの分化機構を明らかにし, さらにこの分化を抑制できる培養系を再構築することで, foxl3を含めた鳥類PGCの雌性分化関連因子の機能解析が飛躍的に発展するものと考える.

Ling and 3 years ago, (1) the results of RNA-seq analysis showed that there was no significant difference in qPCR analysis. (2) Ling and 3 years ago, the results of qPCR analysis, (1) the results of Ling and 3 years old, (1) the results of Ling and 3 years old. The main results are as follows: (1) in the qPCR analysis, the reason is that the PGC special factor is complete, and the RNA-seq analysis shows that there is a difference between the two. On one side (2), the source of the stimulus is PGC, the acid stimulus, the RNA-seq analysis of the factor of the origin of the PGC, and the confirmation of the factor. In the previous year, the results showed that the RNA-seq analysis was performed, the gonad was analyzed by PGC, and the gonadal gland was determined to differentiate and induce differentiation in the first place. In this paper, the results of the study are not available to the public in general. In the first place, it was planned that there would be a change in the number of children in the PGC industry, which was planned to be changed in the first place. In the process of cell culture, there was a lot of growth and differentiation, and there was a lot of trouble. To improve the resolution of the problem, the order and the 3-year training of the PGC undifferentiated maintenance agency are required to clarify the performance of the system. The purpose of this paper is to analyze and differentiate the immune staining of PGC. The RNA-seq analysis shows that there is no difference between the two. The results showed that during the process of PGC differentiation, the reproductive cells had sexual loss, and the reproductive cells of the reproductive cycle had lost their sexual ability. This achievement is the report of the Spring Conference of the Japan Poultry Society in 2022. In the future, the mechanism of differentiation is clear, and the inhibition of differentiation is very important. The foxl3 contains PGC-like female differentiation factors that can be used to analyze the performance of the test.

项目成果

ニワトリ始原生殖細胞の体細胞分化に関する研究

鸡原始生殖细胞体细胞分化的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: 市川健之助;元榮柚花;江崎 僚;松崎芽衣;堀内浩幸
• 通讯作者: 堀内浩幸

遺伝子発現プロファイルに基づく, ニワトリ始原生殖細胞の性分化機構の予測

基于基因表达谱预测鸡原始生殖细胞性分化机制

• 发表时间: 2020
• 作者: 市川健之助;中村隼明;江崎僚;松崎芽衣;堀内浩幸
• 通讯作者: 堀内浩幸

Prediction of sex-determination mechanisms in avian primordial germ cells using RNA-seq analysis

使用 RNA-seq 分析预测鸟类原始生殖细胞的性别决定机制

• DOI: 10.1101/2022.02.24.481709
• 发表时间: 2022
• 期刊: bioRxiv
• 作者: Ichikawa Kennosuke;Nakamura Yoshiaki;Bono Hidemasa;Ezaki Ryo;Matsuzaki Mei;Horiuchi Hiroyuki
• 通讯作者: Horiuchi Hiroyuki